堿性成纖維細(xì)胞生長因子調(diào)節(jié)大鼠心臟成纖維細(xì)胞β-catenin的表達(dá).pdf

1、目的：探討堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)對心臟成纖維細(xì)胞低氧/復(fù)氧損傷后Wnt通路中β-catenin蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制。
　　 方法：采用物理缺氧法制作體外培養(yǎng)SD大鼠心臟成纖維細(xì)胞低氧/復(fù)氧損傷模型。將細(xì)胞隨機(jī)分6組(1)對照組：細(xì)胞置于常氧培養(yǎng)箱內(nèi)持續(xù)孵育。(2)低氧/復(fù)氧組(損傷組)：細(xì)胞置于低氧培養(yǎng)箱中低氧培養(yǎng)24小時，然后置于常氧培養(yǎng)箱中復(fù)氧培養(yǎng)半小時。(3-6)堿性成纖維細(xì)胞生長因子+低氧/復(fù)氧組(堿性

2、成纖維細(xì)胞生長因子干預(yù)組)，細(xì)胞低氧/復(fù)氧后以堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)處理(堿性成纖維細(xì)胞生長因子濃度5μg/L、10μg/L、20μg/L、40μg/L)。實(shí)驗(yàn)采用采用3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)比色法、末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP切口末端標(biāo)記(TUNEL)法、免疫熒光法分析檢測心臟成纖維細(xì)胞相對活力、凋亡百分率、β-

3、catenin蛋白的平均熒光值。
　　 結(jié)果： SD(Sprague Dawley)大鼠低氧/復(fù)氧后MTT檢測結(jié)果提示堿性成纖維細(xì)胞生長因子+低氧/復(fù)氧組較低氧/復(fù)氧損傷組增值率增加(P＜0.05)，而激光共聚焦顯微鏡結(jié)果提示堿性成纖維細(xì)胞生長因子+低氧/復(fù)氧組β-catenin蛋白平均熒光值高于低氧/復(fù)氧損傷組(P＜0.05)，β-catenin蛋白增多；TUNEL陽性反應(yīng)產(chǎn)物百分比較低氧/復(fù)氧損傷組減少(P＜0.05)。