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文檔簡介
1、目的:觀察登革2型病毒NGC株(Dengue Virus-2NGC Strain,DENV-2NGC)誘導(dǎo)的HUVEC凋亡及其Fas/FasL表達的變化。
方法:利用BALB/c乳鼠腦內(nèi)接種以及C6/36細(xì)胞增殖病毒,RT-PCR鑒定病毒mRNA,細(xì)胞半數(shù)感染量(TCID50)測定法確定病毒滴度;直接免疫熒光法觀察DENV-2吸附HUVECs;AO/EB染色法檢測DENV-2感染后HUVECs細(xì)胞凋亡形態(tài);流式細(xì)胞術(shù)動態(tài)測定不
2、同滴度DENV-2誘導(dǎo)HUVECs凋亡率的變化,并檢測不同劑量病毒感染48h的細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞感染情況及HUVECs膜表面Fas/FasL的表達水平。組間比較采用獨立樣本t檢驗。
結(jié)果:
1.DENV-2 NGC株能夠通過乳鼠腦內(nèi)接種及C6/36細(xì)胞增殖,增殖的DENV-2對C6/36細(xì)胞的TCID50為10-5.17。
2.DENV-2能夠感染HUVECs。
3.與對照組相比,接種病毒組的HUV
3、ECs凋亡率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,但各組凋亡率并未隨著時間延長和病毒劑量增加,呈現(xiàn)出明顯的上升或下降的趨勢。
4.DENV-2誘導(dǎo)的HUVECs凋亡率變化并未與感染率呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性。
5.與對照組相比,接種病毒組的HUVECs膜表面Fas的表達水平均有明顯的增加,但FasL表達水平僅在接種病毒的1000TCID50組顯著增加。
結(jié)論:DENV-2 NGC能夠感染HUVECs并誘導(dǎo)其凋亡,可能是DHF/DSS
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