肝細胞生長因子對廢用性骨骼肌萎縮形態(tài)學及酶組織化學的影響.pdf

1、制動是現(xiàn)代骨關(guān)節(jié)病損的主要治療手段，然而制動在保護受損組織的同時，也會對周圍健康組織產(chǎn)生諸多不利的影響。研究表明：制動會引起肌肉生理、生化及生物力學等的改變，從而導致其功能的下降。廢用性肌萎縮是骨科臨床最常見的并發(fā)癥及急待解決的問題之一。 肝細胞生長因子(HepatocytegrowthfactorHGF)是1984年Nakamura等從部分肝切除大鼠的血清中分離出的一種能刺激原代培養(yǎng)的肝細胞生長和合成的肝源性因子，并首次將它命

2、名為肝細胞生長因子。隨著對之研究的深入，發(fā)現(xiàn)其為一種多功能細胞因子，并能被多種細胞分泌，其有一定的促進血管形成，神經(jīng)營養(yǎng)及促進細胞的增殖與分化的作用。本實驗將肝細胞因子用于廢用性肌萎縮的研究。觀察其對廢用性肌萎縮的防治作用。 目的： 通過觀察肝細胞生長因子對廢用性骨骼肌形態(tài)及酶組織化學的觀察，探討肝細胞生長因子對廢用性肌萎縮的的防治作用。 方法： 雄性Wistar大鼠24只，體重200-250g，隨機分為

3、正常組，對照組及實驗組。首先制備廢用性骨骼肌萎縮的動物模型：用2％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(40mg/kg體重)后，按照Jozsa等的方法，將大鼠右后肢用可塑性石膏由足跖管型固定至膝上1cm處，膝關(guān)節(jié)固定于屈曲位1000，踝關(guān)節(jié)固定于跖屈600，以使小腿肌肉保持松弛位。石膏浸液摻入苦味酸以防大鼠啃咬。實驗組于制動當日起將制成10mg/ml的肝細胞生長因子溶液并按10mg/kg大鼠體重注射入大鼠右后肢腓腸肌(每只0.20～0.25m1)，每

4、天1次；對照組制動后當日起按1ml/kg大鼠體重注射等量生理鹽水，每天1次；正常組不做任何處理，自由飼養(yǎng)。4周后完整取下各組右后肢腓腸肌。行右后肢腓腸肌肌濕重，肌纖維直徑及橫截面積的檢測；及肌肉蛋白含量、肌肉Na+-K+-ATP酶，Ca2+-ATP酶活性的檢測。將檢測結(jié)果輸入SPSS10.0軟件，統(tǒng)計方法采用完全隨機設計資料的多個樣本均數(shù)的方差分析(one-wayANOVA)，組間兩兩比較用SNK法。取α=0.05，當p＜0.05時認為

5、各組數(shù)據(jù)間差異具有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1.肌濕重(g)：正常組：2.45+0.21，對照組：1.34±0.14，實驗組：1.84+0.20。各組之間比較，有顯著性差異，p＜0.01(F=70.74)?？梢钥闯?，局部應用HGF，可使肌萎縮速度顯著減緩。 2.肌肉蛋白含量(mg/g)：正常組：91.84+12.17，對照組：51.11±6.54，實驗組75.46±11.03。各組之間比較，有顯著性差異，p＜0.01

6、(F=32.27)。可認為局部應用HGF后明顯抑制了廢用性骨骼肌肌蛋白質(zhì)的喪失。 3.肌肉Na+-K+-ATP酶活性為(μmolPi/mgprot/hour)：正常組：2.60±0.28，對照組：1.18±0.14，實驗組：1.65+0.21。Ca2+-ATP酶活性為(μmolPi/mgprot/hour)：正常組：2.91±0.32，對照組：1.40±0.28，實驗組：2.39±0.25。各組間比較有顯著性差異，p＜0.01(

7、Na+-K+ATP酶活性F=89.04，Ca2+ATP酶活性F=57.51)?？烧J為局部應用HGF后明顯抑制了廢用性骨骼肌Na+-K+ATP酶活性、Ca2+ATP酶活性的降低。 4.肌纖維直徑(μm)與橫截面積(μr2)的變化：正常組分別為：17.17+1.94，960.75±65.69；對照組分別為：10.99±1.92，578.83±49.77；實驗組分別為：14.34±1.71，765.91+47.98。各組間比較有顯著性

8、差異，p＜0.01(肌纖維直徑F=22.12，肌纖維橫截面積F=96.24)?？烧J為肢體制動后，局部應用HGF可明顯抑制廢用性骨骼肌肌纖維直徑、肌纖維橫截面積的縮小。 結(jié)論： 1.局部應用肝細胞生長因子(HGF)可使肌濕重有較好的保持；抑制廢用性骨骼肌肌纖維直徑、肌纖維橫截面積的縮小。肌萎縮速度顯著減緩。 2.局部應用肝細胞生長因子(HGF)可明顯抑制廢用性骨骼肌肌蛋白的喪失。 3.局部應用肝細胞生長因子