中國人大腸癌EGFR及K-Ras基因突變的初步研究.pdf

1、近年來，大腸癌在全球以及我國的發(fā)達地區(qū)的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，提高治療效果、延長生存時間是目前急需解決的問題。與此同時，新的治療方法和藥物也在不斷問世，分子靶向藥物是發(fā)展最快的一個方向，特別是單克隆抗體與傳統(tǒng)的化療藥物的聯(lián)合已經(jīng)使得晚期大腸癌患者的生存期超過了24個月。小分子靶向藥物在大腸癌方面的應用也在不斷探索之中，其較低的毒性和靶向的特異性引起廣泛的關(guān)注，而表皮生長因子受體(EGFR)的靶向抑制劑就是其中之一。 眾多的研究表

2、明，EGFR過度表達與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系，作為EGFR抑制劑之一的吉非替尼也就應運而生，并在治療非小細胞肺癌方面取得了較好的效果。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，吉非替尼在非小細胞肺癌患者中的療效與EGFR外顯子突變有密切關(guān)系，使得檢測EGFR外顯子突變成為預測吉非替尼療效的手段之一。因此，檢測大腸癌EGFR外顯子突變也為將吉非替尼療應用于大腸癌提供理論依據(jù)。K-Ras基因是EGFR信號轉(zhuǎn)導通路下游的一個基因，它的突變使得細胞不需要E

3、GFR信號轉(zhuǎn)導而直接激活下游的激酶系統(tǒng)，是大腸癌腫瘤形成的多種機制之一，并導致對EGFR的單克隆抗體的耐藥，因此，探索EGFR外顯子和K-Ras基因突變將為大腸癌分子靶向治療提供理論依據(jù)。 目的 繪制中國人大腸癌EGFR外顯子及K-Ras基因的突變譜，為基因靶向藥物設計、臨床療效預測等提供依據(jù)。 方法 取2004年1月至2006年3月經(jīng)復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院手術(shù)治療的39例結(jié)直腸腺癌患者的石蠟包埋標本，每例

4、切取10h厚的組織，經(jīng)過DNA提取、PCR擴增及產(chǎn)物純化、基因測序等步驟對EGFR基因的18-21號外顯子及K-Ras基因的12，13及61號編碼子的突變情況進行測定。同時對39例患者進行生存隨訪，使用SPSS 12.0的統(tǒng)計軟件進行各種統(tǒng)計分析。 結(jié)果 (1)所有39例大腸癌組織中共有15例存在EGFR第19號外顯子的缺失突變，突變率為38.5％，均為第2238-2255位核苷酸缺失(2例為純合型突變，其余均為雜合型突

5、變)。 (2)檢測EGFR第20號外顯子第2607位核苷酸的多態(tài)性發(fā)現(xiàn)：野生型(從型)占74.4％，而雜合型(AG型)占25.6％，無突變型。 (3)未檢測到EGFR第18及21號外顯子突變。 (4)共有12例存在K--Ras基因第12號編碼子突變，均為替代型錯義突變，突變率為30.8％。 (5)單因素分析發(fā)現(xiàn)病理分化程度與K-Ras基因突變有關(guān)(P=0.021)，多因素分析未發(fā)現(xiàn)與K-Ras突變有關(guān)的臨

6、床病理學因素；而單因素和多因素分析均未發(fā)現(xiàn)與EGFR基因突變有關(guān)的臨床病理學因素。 (6)中位隨訪時間為26.5個月，單因素分析未發(fā)現(xiàn)EGFR基因突變或K-Ras基因突變與患者的總生存時間有關(guān)，而多因素分析發(fā)現(xiàn)EGFR突變與總生存時間有明顯相關(guān)性(P=0.027)。 結(jié)論 (1)中國人大腸癌EGFR基因的突變率明顯高于歐美國家，以19號外顯子的第2238-2255位核苷酸缺失為主。 (2)大腸癌EGFR外