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文檔簡(jiǎn)介
1、本論文重點(diǎn)運(yùn)用質(zhì)譜分析方法開展了珍稀、瀕危野生福建金線蓮中主要成分黃酮類及芳香酸類化合物的快速分析鑒定,以及野生與生物技術(shù)栽培品種相關(guān)成分及其含量比較分析研究。首先,運(yùn)用正、負(fù)離子檢測(cè)模式相結(jié)合的RRLC-MS/MS及MSE方法對(duì)福建金線蓮中所含化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)分析,建立了適合于快速鑒定福建金線蓮粗提物中黃酮及芳香酸類成分的質(zhì)譜分析方法。進(jìn)一步采用RRLC-MS與1H NMR的平行動(dòng)態(tài)譜(NMR/RRLC-MS PDS)和異相關(guān)譜(N
2、MR/KRLC-MS HCS)方法,開展了該提取物中多組分無需完全分離的同步結(jié)構(gòu)鑒定研究,建立了針對(duì)混合物組分群中黃酮及芳香酸等不同類型成分的NMR/RRLC-MS PDS和HCS譜學(xué)分析方法,拓展了這二種新型譜學(xué)分析方法的應(yīng)用范圍;同時(shí)結(jié)合RRLC-MS/MS等手段,實(shí)現(xiàn)了混合物組分群中不同類型成分無需完全分離的快速結(jié)構(gòu)鑒定。此外,利用RRLC-MS/MS方法,開展了野生與生物技術(shù)栽培的福建金線蓮中主要成分及其含量的比較分析研究。本項(xiàng)
3、研究結(jié)果為福建金線蓮的可持續(xù)利用以及篩選與評(píng)價(jià)其人工培育品種及技術(shù)工藝研究提供了重要分析依據(jù)。
本論文的研究?jī)?nèi)容主要包括以下三個(gè)部分:
1.福建金線蓮粗提物多組分的RRLC-MS/MS及MSE快速鑒定方法研究
為了建立適用于福建金線蓮粗提物多組分的RRLC-MS/MS分析方法,首先系統(tǒng)開展了液相色譜條件與質(zhì)譜參數(shù)的優(yōu)化,獲得了適宜的色譜和質(zhì)譜條件,成功地建立了用于95%乙醇提取物中常量與微量成分
4、結(jié)構(gòu)鑒定的正、負(fù)離子檢測(cè)模式相結(jié)合的RRLC-MS/MS及MSE分析方法。采用上述分析方法,開展了福建金線蓮95%乙醇提取物中化學(xué)成分的系統(tǒng)分析研究,同時(shí)結(jié)合黃酮苷類化合物的裂解規(guī)律及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,共分析推斷出17個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。其中包括4個(gè)芳香酸類化合物,5個(gè)黃酮苷元、5個(gè)黃酮O-單糖苷類,2個(gè)黃酮O-雙糖苷類化合物和對(duì)羥基苯甲醛,其中3個(gè)化合物為首次從該植物中發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分。本研究表明,采用以RRLC-MS/MS方法為主,并結(jié)合MS
5、E技術(shù)的分析思路,可以實(shí)現(xiàn)福建金線蓮中黃酮類、芳香酸類及其它化學(xué)成分的簡(jiǎn)便、快速的結(jié)構(gòu)鑒定。
2.福建金線蓮提取物組分群的NMR與RRLC-MS平行動(dòng)態(tài)譜和異相關(guān)譜分析方法研究
以福建金線蓮95%乙醇提取物為研究對(duì)象,利用反相制備型高效液相色譜技術(shù)獲取含量呈連續(xù)動(dòng)態(tài)變化的系列混合物,并分別進(jìn)行RRLC-MS和1H NMR譜測(cè)定。然后采用MATLAB軟件編寫的數(shù)據(jù)處理程序,對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析,構(gòu)成了NMR
6、/RRLC-MS PDS和NMR/RRLC-MS HCS譜。通過綜合分析,獲取多組分混合物中同一成分的質(zhì)荷比(m/z)和化學(xué)位移值(6)等相關(guān)性信息,利用這些關(guān)鍵信息并結(jié)合RRLC-MS/MS分析方法,對(duì)系列流份中的黃酮類及芳香酸類等相關(guān)成分進(jìn)行了分析鑒定研究。實(shí)現(xiàn)了該提取物中13個(gè)成分的同步結(jié)構(gòu)鑒定,其中包括8個(gè)黃酮類化合物,4個(gè)芳香酸類化合物和對(duì)羥基苯甲醛,其中5個(gè)化合物為首次從該屬植物中發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分。因此,運(yùn)用本研究方法實(shí)現(xiàn)了混
7、合物中不同類型成分無需完全分離的快速結(jié)構(gòu)鑒定,并拓展了這二種新型譜學(xué)分析方法的應(yīng)用范圍。
3.野生與生物技術(shù)栽培的福建金線蓮主要成分及其含量的比較分析研究
在上述研究基礎(chǔ)上,采用RRLC-MS/MS方法,進(jìn)一步開展了野生與生物技術(shù)栽培的福建金線蓮中相關(guān)成分及其含量的比較分析研究。首先分別從精密度、準(zhǔn)確度等方面對(duì)該分析方法進(jìn)行了細(xì)致、系統(tǒng)的方法學(xué)考察,結(jié)果顯示其靈敏度高、準(zhǔn)確度高、精密度良好。采用建立的RRLC
8、-MS/MS方法,針對(duì)野生(J0)與9種不同生物技術(shù)栽培品種(J1-J9)獲得的金線蓮95%乙醇提取物進(jìn)行了化學(xué)成分比較分析研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在生物技術(shù)栽培獲得的品種J1和J5中化學(xué)成分種類和數(shù)目與野生品種極為相近。進(jìn)一步對(duì)于野生與生物技術(shù)栽培品種中20個(gè)主要成分進(jìn)行了含量分析,同時(shí)結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)6個(gè)黃酮類成分進(jìn)行了定量分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與野生金線蓮主要成分及含量近似的2個(gè)生物技術(shù)栽培品種(J5,J6);以及與野生品種主要成分及含量差異較大的品種
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