奶牛產后生殖激素及其受體的含量與胎衣不下發(fā)生的相關性.pdf

1、奶牛胎衣不下（RFM）對奶牛的生產性能和繁殖能力有嚴重危害，是臨床上常見產科疾病之一。引起該病的病因十分復雜，疾病發(fā)生的分子基礎尚不明確，目前仍沒有切實有效的方法預測該病的發(fā)生。因此，對胎衣不下病因的研究對于管控該病至關重要。產后胎衣正常分離和排出的過程復雜，涉及到母體和胎兒體內多種激素及其受體水平的改變，任何一個環(huán)節(jié)出現異常都有可能導致RFM的發(fā)生。因此，對奶牛血液中的激素和相關因子進行檢測，分析與胎衣不下發(fā)生的相關性，有可能發(fā)現預測

2、該病發(fā)生的關鍵因素。本試驗對分娩后奶牛血漿中激素的含量進行測定，并對胎兒胎盤中激素受體的表達量進行了檢測，分析奶牛胎衣不下與激素含量及其受體表達的相關性，探討奶牛胎衣不下的發(fā)生機制。選取RFM組和胎衣正常脫落(NRFM)組奶牛各10頭，試驗奶牛分娩后立即進行尾靜脈采血。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血漿中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、雌激素(E2)、催產素(OT)和前列腺素F2α(PGF2α)的含量。采集RFM組和NRFM組奶牛胎兒

3、胎盤組織，運用實時熒光定量PCR技術(RT-qPCR)檢測胎盤組織中血管緊張素1型和2型受體(AT1-R和AT2-R)、雌激素受體α(ERα)、催產素受體(OTR)、前列腺素F2α受體(FP)基因mRNA相對表達水平的差異。為進一步在蛋白水平對AT1-R和ERα基因表達量進行分析，通過蛋白免疫印跡技術(Western blotting)對胎盤組織中AT1-R和ERα蛋白表達水平進行檢測。結果表明，RFM組血漿中AngⅡ和OT的含量極顯著

4、低于NRFM組(P＜0.01)，E2的含量顯著低于NRFM組(P＜0.05)，而PGF2α的含量差異不顯著(P＞0.05)。AT1-R、AT2-R、ERα、OTR和FP基因mRNA在胎兒胎盤均有表達，其中RFM組AT1-R、AT2-R和ERαmRNA表達量極顯著低于NRFM組(P＜0.01)，OTR和FP基因mRNA表達量差異不顯著(P＞0.05)。RFM組胎兒胎盤中AT1-R和ERα蛋白表達極顯著低于NRFM組(P＜0.01)，這與m

5、RNA的表達水平上基本一致。由此可見，奶牛血漿中激素含量及胎兒胎盤中激素受體的表達量與RFM的發(fā)生密切相關，因此可以通過檢測血漿中AngⅡ、E2和OT的含量變化來預測RFM的發(fā)生。從NRFM組胎兒胎盤中AT1-R、AT2-R和ERα基因表達的高度表達可以推測，AngⅡ和E2通過與其特異性受體結合，發(fā)揮節(jié)律性地收縮血管、增加MMPs的表達和活性、誘導細胞質Ca2+濃度升高等作用，有利于胎盤排出。但OTR和FP的表達及作用機理對奶牛RFM的