茶多酚對實驗性大腸癌的免疫功能影響和成瘤預(yù)防作用.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分：實驗性大鼠大腸癌機(jī)體免疫功能的改變 目的：模擬人類大腸癌的形成，建立一種大腸癌的模型并探討實驗性大腸癌時機(jī)體免疫功能變化。 方法：利用1，2-二甲肼(DMH)誘導(dǎo)S-D大鼠建立大腸癌模型，10只大鼠隨機(jī)分2組，每組5只：(1)對照組；(2)成瘤組(DMH組)。從實驗第1周開始，成瘤組每周皮下注射1次DMH，劑量為20mg/kg，注射部位為右下肢皮下，連續(xù)20周，對照組大鼠則注射相同體

2、積的1mmol/L的EDTA溶液。觀察21周各組大鼠大腸腫瘤發(fā)生情況并HE染色進(jìn)行病理檢查。流式細(xì)胞(FCM)檢測16周、21周外周血和21周脾臟中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD25+的表達(dá)率，ELISA法檢測21周各組脾細(xì)胞經(jīng)PHA刺激72h后分泌IFN-γ的能力。 結(jié)果：21周時處死大鼠并對大鼠的腸道進(jìn)行解剖，結(jié)果表明利用該方法的誘癌率達(dá)100％(5/5)，對照組僅1只發(fā)現(xiàn)兩枚腺瘤。16周時成瘤組

3、外周血CD3+和CD3+CD4+較對照組表達(dá)率略有降低，但兩者無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；21周時成瘤組外周血CD3+CD4+、CD4/CD8和脾臟中CD3+CD4+、CD3+CD25+、CD4/CD8較對照組明顯降低(P<0.05)；成瘤組脾細(xì)胞PHA刺激72h后分泌IFN-γ的能力較對照組有顯著的下降(P<0.01)。 結(jié)論：利用DMH成功建立了S-D大鼠的大腸癌模型，證明了實驗性大鼠大腸癌同人類大腸癌具有類似的免疫功能降

4、低，主要是細(xì)胞免疫功能的下降。 第二部分：茶多酚對實驗性大腸癌的免疫功能影響和成瘤預(yù)防作用研究 目的：大量研究表明茶多酚(Tea Polyphenols，TPs)能提高機(jī)體的免疫功能。通過第一部分研究證實DMH誘導(dǎo)的實驗性大腸癌與人類大腸癌相似，機(jī)體的免疫功能處于抑制狀態(tài)，本部分研究旨在探討茶多酚對荷大腸癌大鼠免疫功能的影響，在此基礎(chǔ)上，探討茶多酚對大腸癌形成過程中的預(yù)防作用。 方法：利用DMH誘導(dǎo)S-D大鼠建立

5、大腸癌模型，10只大鼠隨機(jī)分2組，每組5只：(1)成瘤組；(2)茶多酚組。茶多酚組從實驗第1天起以0.1％(W/V)的茶多酚水溶液作為唯一飲用水，2組均每周同一時間皮下注射1次DMH，劑量為20mg/kg，注射部位為右下肢皮下，連續(xù)20周。觀察21周各組大鼠大腸腫瘤發(fā)生情況并行病理學(xué)檢查。流式細(xì)胞(FCM)檢測各組16周、21周外周血和21周脾臟中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD25+的表達(dá)率，ELISA法檢測

6、21周各組脾細(xì)胞經(jīng)PHA刺激72h后分泌IFN-γ的能力。 結(jié)果：21周時茶多酚組和成瘤組的全部大鼠誘導(dǎo)出大腸腫瘤，茶多酚組肉眼可見平均大腸腫瘤和平均腺癌數(shù)明顯低于成瘤組(P<0.05)。病理證實茶多酚組和成瘤組誘癌率分別是80％(4/5)和100％(5/5)，茶多酚組Dukes分期明顯好于成瘤組，多為B-C期，而成瘤組大多是D期。茶多酚組16周外周血CD3+CD25+較成瘤組明顯升高(P<0.05)；茶多酚組21周外周血CD3