丁酸梭菌對(duì)實(shí)驗(yàn)性大腸桿菌K88感染肉雞免疫功能、腸道屏障功能和盲腸微生物的影響.pdf

1、本試驗(yàn)研究了丁酸梭菌對(duì)多種致病菌的體外抑菌效果和對(duì)肉雞免疫、腸道屏障功能以及腸道菌群的影響。試驗(yàn)包括兩部分:試驗(yàn)一，研究了丁酸梭菌與鼠李糖乳桿菌對(duì)腸道致病菌的體外抑菌效果;試驗(yàn)二，是通過對(duì)肉雞進(jìn)行大腸桿菌K88感染后，研究日糧中添加丁酸梭菌對(duì)感染肉雞的免疫功能、腸道粘膜形態(tài)、腸道屏障功能以及盲腸微生物的影響。
　　 試驗(yàn)一:將丁酸梭菌、鼠李糖乳桿菌單株及兩株菌按照1∶1混合后分別與大腸桿菌C82928、金黃色葡萄球菌SHZ018

2、、沙門氏菌C79及產(chǎn)氣莢膜梭菌以100∶1的比例混合接種于厭氧液體培養(yǎng)基中進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。結(jié)果表明丁酸梭菌單株及與鼠李糖混合培養(yǎng)組對(duì)大腸桿菌C83928從8h開始有明顯抑制作用，但鼠李糖乳桿菌單株對(duì)大腸桿菌C83928沒有抑制作用;丁酸梭菌單株對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌都從12h開始有明顯的抑制作用，使菌量下降3-4個(gè)數(shù)量級(jí)，鼠李糖乳桿菌對(duì)這3株菌有一定的抑制作用，可使菌量下降1-2個(gè)數(shù)量級(jí)，兩種益生菌混合后對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌和

3、沙門氏菌的抑制效果比丁酸梭菌單株顯示出稍強(qiáng)的生物拮抗作用，因此認(rèn)為這種抑菌作用主要是由于丁酸梭菌引起。
　　 試驗(yàn)二:選取1日齡雛雞360羽，隨機(jī)分為4組，分別為丁酸梭菌組、抗生素組、空白對(duì)照組和攻毒組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞，空白對(duì)照組、攻毒組飼喂無抗生素的基礎(chǔ)日糧，丁酸梭菌組飼喂含2×107CFU/g丁酸梭菌的日糧、抗生素組飼喂含20mg/kg硫酸粘桿菌素的日糧，7日齡時(shí)攻毒組、丁酸梭菌組和抗生素組分別口服1×108

4、CFU/g大腸桿菌K88菌液0.5ml，空白對(duì)照組口服生理鹽水0.5ml。分別于10、14、21、28日齡時(shí)，每組選取6只屠宰，搜集血清、空腸腸段、腸道粘膜內(nèi)容物、盲腸內(nèi)容物。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明:日糧添加丁酸梭菌有助于提高血清補(bǔ)體C3、C4、溶菌酶的含量，在感染動(dòng)物免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用。10日齡時(shí)，丁酸梭菌組補(bǔ)體C3含量分別比抗生素組、空白對(duì)照組高23.07％(P＜0.05)、38.59％(P＜0.05);-體C4含量比抗

5、生素組、空白對(duì)照組、攻毒組分別高22.34％(P＜0.05)、35.24％(P＜0.05)、32.44％(P＜0.05)。14日齡時(shí)，丁酸梭菌組補(bǔ)體C4含量比攻毒組高14.58％(P＜0.05);21日齡時(shí)，丁酸梭菌組的C3、C4及溶菌酶的含量均顯著高于其它試驗(yàn)組。
　　 日糧中添加丁酸梭菌能夠增強(qiáng)肉雞血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及腸粘膜sIgA的含量，對(duì)機(jī)體防御大腸桿菌感染有積極意義。丁酸梭菌組、抗生素組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)Ig

6、A、IgM、IgG均高于攻毒組。10日齡時(shí)，丁酸梭菌組、抗生素組、攻毒組IgA分別比空白對(duì)照組高47.7％(P＜0.05)、34.03％(P＜0.05)、35.66％(P＜0.05);丁酸梭菌組血清中IgG的含量比空白對(duì)照組組高22.24％(P＜0.05);丁酸梭菌組空腸黏膜中sIgA含量分別比抗生素組、空白對(duì)照組和攻毒組高45.50％(P＜0.05)、88.94％(P＜0.05)和95.32％(P＜0.05)。14日齡時(shí)，丁酸梭菌組s

7、IgA含量比攻毒組高45.71％(P＜0.05)。21d日齡，丁酸梭菌組、抗生素組IgA分別比攻毒組高25.22％(P＜0.05)、16.54％(P＜0.05)。28日齡時(shí)，丁酸梭菌組IgM分別比抗生素組、空白對(duì)照組、攻毒組高22.83％(P＜0.05)、49.53％(P＜0.05)、22.89％(P＜0.05)。
　　 日糧中添加丁酸梭菌有利于提高大腸桿菌K88感染肉雞腸道粘膜細(xì)胞因子水平，從而提高機(jī)體免疫力。整個(gè)試驗(yàn)階段表現(xiàn)

8、出丁酸梭菌組與抗生素組TNF-a、IL-4含量均略高于攻毒組。10日齡時(shí)，10d時(shí)，丁酸梭菌組的空腸黏膜中TNF-a、IL-4的含量均高于抗生素組、空白對(duì)照組、攻毒組，丁酸梭菌組空腸黏膜中TNF-a含量比攻毒組提高56.84％(P＜0.05)。21日齡時(shí)，丁酸梭菌組、抗生素組、空白對(duì)照組白介素IL-4的含量分別比攻毒組高38.31％(P＜0.05)、18.47％(P＞0.05)、35.22％(P＜0.05)。
　　 日糧中添加丁

9、酸梭菌能促進(jìn)感染大腸桿菌肉雞空腸絨毛的生長。10日齡時(shí)，丁酸梭菌組隱窩深度顯著低于其它組;14、21、28日齡時(shí)丁酸梭菌組、抗生素組、空白對(duì)照組隱窩深度均顯著低于攻毒組;丁酸梭菌組空腸絨毛高度在14d、21d、28日齡時(shí)均顯著高于其它試驗(yàn)組。
　　 日糧中添加丁酸梭菌能促進(jìn)腸道屏障功能的修復(fù)，降低血清內(nèi)毒素、二胺氧化酶(DAO)的含量及細(xì)菌移位的發(fā)生率。大腸桿菌感染各組血清內(nèi)毒素水平及DAO含量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于空白對(duì)照組，

10、21日齡時(shí)，攻毒組DAO含量分別比丁酸梭菌組、抗生素組高49.11％(P＜0.05)、48.87％(P＜0.05)。28日齡時(shí)，攻毒組內(nèi)毒素含量分別比丁酸梭菌組、空白對(duì)照組高25％(P＜0.05)、50.79％(P＜0.05);各組的細(xì)菌易位率隨著時(shí)間是逐漸降低的，并且各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，丁酸梭菌組和抗生素組的細(xì)菌易位率均低于攻毒組，尤以丁酸梭菌組效果最為明顯。
　　 日糧中添加丁酸梭菌能于促進(jìn)肉雞盲腸有益菌的生長，抑制致病菌的生長。1

11、4、21日齡時(shí)，丁酸梭菌組肉雞盲腸內(nèi)容物乳酸菌數(shù)量顯著高于其它組，雙歧桿菌的數(shù)量比攻毒組高8.50％（P＜0.05）；盲腸內(nèi)容物丁酸梭菌含量分別比攻毒組高7.20％(P＜0.05)。28日齡時(shí)，丁酸梭菌組盲腸內(nèi)容物的乳酸菌數(shù)量比抗生素組高6.46％(P＜0.05)，雙歧桿菌數(shù)量顯著高于其它組。日糧中添加丁酸梭菌有利于減少致病情況下肉雞盲腸大腸桿菌的數(shù)量，10日齡時(shí)，攻毒組盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌的數(shù)量顯著高于丁酸梭菌組和抗生素組，21、28