甘草次酸對(duì)新生仔豬生長(zhǎng)的影響及其機(jī)理研究.pdf

1、甘草為豆科植物甘草、脹果甘草或光果甘草的根及根莖，具有補(bǔ)脾益氣、祛痰止咳、清熱解毒、緩急止痛、調(diào)和藥性等功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，甘草次酸(GA)是甘草的有效成分之一，具有抗炎、抗?jié)?、抗過(guò)敏、抗病毒、保肝、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用．其分子結(jié)構(gòu)與氫化可的松相似，通過(guò)抑制動(dòng)物體內(nèi)11β-羥固醇脫氫酶-2型的活性，可以減慢氫化可的松的轉(zhuǎn)化，提高作用強(qiáng)度，因此臨床上常作為后者的代用品．近年來(lái)的研究顯示，糖皮質(zhì)激素對(duì)新生仔豬的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。如

2、初生時(shí)應(yīng)用地塞米松，仔豬的生長(zhǎng)性能增強(qiáng)。氫化可的松可以促進(jìn)新生仔豬小腸發(fā)育和小腸上皮細(xì)胞內(nèi)源性精氨酸合成功能。由于母豬乳汁精氨酸不能滿足仔豬的需要，仔豬內(nèi)源性合成的精氨酸具有重要的生理意義。然而，7～21日齡仔豬體內(nèi)氫化可的松濃度和內(nèi)源性合成精氨酸比1～3日齡顯著降低，因此呈現(xiàn)極限下生長(zhǎng)。增加仔豬精氨酸營(yíng)養(yǎng)是促進(jìn)其生長(zhǎng)性能的有效手段。 基于糖皮質(zhì)激素促進(jìn)新生仔豬生長(zhǎng)發(fā)育和內(nèi)源性精氨酸合成功能、甘草次酸具有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用和多

3、方面的藥理活性等認(rèn)識(shí)，尤其是甘草次酸對(duì)新生仔豬的生長(zhǎng)和精氨酸營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的研究尚屬空白，本研究觀察了甘草次酸對(duì)7～21日齡哺乳仔豬和代乳料飼喂的早期斷奶仔豬的生長(zhǎng)的影響，并從仔豬內(nèi)分泌、血液精氨酸濃度、血液學(xué)、血液生化、血液揮發(fā)性脂肪酸、內(nèi)臟器官發(fā)育、小腸黏膜鳥(niǎo)氨酸脫羧酶活性變化，以及體外對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的影響等方面研究了甘草次酸的作用和機(jī)理。 試驗(yàn)Ⅰ.甘草次酸對(duì)哺乳仔豬生長(zhǎng)的影響 通過(guò)灌服不同劑量甘草次酸篩選出較佳的劑量，以

4、及甘草次酸與氫化可的松的比較觀察了甘草次酸對(duì)哺乳仔豬生長(zhǎng)的影響．20頭7日齡杜×長(zhǎng)×大哺乳仔豬按其體重和性別在窩內(nèi)隨機(jī)分為4個(gè)處理，每個(gè)處理5頭。3個(gè)試驗(yàn)組仔豬分別灌服GA25、50、100 mg·pig<'-1>，對(duì)照組灌服等體積的生理鹽水．每日8：00灌服1次，連續(xù)3 d。仔豬在原窩哺乳。其余飼養(yǎng)管理按常規(guī)。測(cè)定仔豬7、14、21日齡體重、平均日增重和增重率。發(fā)現(xiàn)100 mg·pig<'-1>仔豬平均日增重、增重率最高。36頭7日齡

5、哺乳仔豬按其體重和性別在窩內(nèi)隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理12頭．氫化可的松組、GA組、對(duì)照組仔豬分別灌服氫化可的松10 mg·k<'-1>體重、GA40 mg·kg<'-1>體重或相應(yīng)體積的生理鹽水。測(cè)定指標(biāo)、方法同前。結(jié)果表明，GA組仔豬7～14、7～21日齡平均日增重顯著高于對(duì)照組；14～21日齡平均日增重顯著高于氫化可的松組。7～21日齡增重率高于氫化可的松組，21日齡體重高于對(duì)照組。氫化可的松組7～14、7～21日齡平均日增重比對(duì)

6、照組有所提高，14～21日齡有所降低。提示，7～9日齡連續(xù)3日灌服GA40 mg·kg<'-1>體重促進(jìn)了7～21日齡哺乳仔豬的生長(zhǎng)，而灌服氫化可的松10mg·kg<'-1>體重作用不明顯。 試驗(yàn)Ⅱ.甘草次酸對(duì)早期斷奶仔豬生長(zhǎng)的影響及劑量篩選 7日齡長(zhǎng)×大仔公豬，使用仔豬代乳粉配制代乳液，預(yù)試2 d后進(jìn)入正式實(shí)驗(yàn)。20頭仔豬單籠飼養(yǎng)，按體重和窩別隨機(jī)均分為4個(gè)處理，每個(gè)處理5頭。對(duì)照組使用基礎(chǔ)日糧；實(shí)驗(yàn)組代乳粉中GA添加

7、劑量分別為100、200、400 mg·kg<'-1>，連續(xù)12 d?？疾熳胸i第9、14、21日齡體重及試驗(yàn)期生長(zhǎng)性能、腹瀉率及14、21目齡血液學(xué)指標(biāo)的變化以確定GA的合適添加劑量。結(jié)果表明，添加200 mg·kg<'-1> GA組14、21日齡體重和9～14、14～21、9～21日齡平均日增重、增重率和平均日采食量最高，腹瀉率最低，9～14日齡料重比最低。400 mg·kg<'-1>GA組14日齡白細(xì)胞總數(shù)顯著高于其余各組，淋巴細(xì)胞

8、數(shù)顯著高于對(duì)照組，單核細(xì)胞數(shù)顯著高于對(duì)照組和100mg·kg<'-1>組。400 mg·kg<'-1>GA組21日齡單核細(xì)胞數(shù)顯著低于100 mg·kg<'-1>GA組；200 mg·kg<'-1>GA組21日齡淋巴細(xì)胞百分比顯著高于100 mg·kg<'-1>GA組。提示，代乳粉添加GA可以影響仔豬的生長(zhǎng)性能、腹瀉率和血液學(xué)指標(biāo)。GA的添力口劑量以200 mg·kg<'-1>較為合適。 試驗(yàn)Ⅲ.甘草次酸對(duì)早期斷奶仔豬血漿激素、

9、氨基酸水平和血液學(xué)指標(biāo)的影響 30頭7日齡長(zhǎng)×大仔公豬，代乳粉為基礎(chǔ)日糧，適應(yīng)性飼養(yǎng)2 d后按體重和窩別隨機(jī)分為對(duì)照組和GA組，每組15頭。GA組代乳粉中添加GA 200 mg·kg<'-1>，連續(xù)12 d。測(cè)定9、14、21日齡體重及試驗(yàn)期的生長(zhǎng)性能。每個(gè)處理隨機(jī)挑選8頭，前腔靜脈采血測(cè)定血漿氨基酸濃度，6頭測(cè)定血漿內(nèi)分泌激素和血液學(xué)指標(biāo)。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，GA組9～14日齡增重率、平均日采食量和精氨酸攝入量顯著提高，料

10、重比顯著降低：9～21日齡增重率提高，料重比顯著降低,21日齡血漿胰高血糖素顯著降低、精氨酸顯著提高；14和21日齡血液淋巴細(xì)胞百分比提高、中性白細(xì)胞百分比顯著降低，14日齡平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度顯著提高；21日齡血液平均紅細(xì)胞容積顯著提高，中性/淋巴細(xì)胞比值顯著降低。提示:代乳粉添加GA 200 mg·kg<'-1>促進(jìn)了早期斷奶仔豬的生長(zhǎng)，增強(qiáng)了內(nèi)源性精氨酸的合成和造血功能，調(diào)節(jié)了內(nèi)分泌和免疫功能。 試驗(yàn)Ⅳ.甘草次酸對(duì)仔豬外

11、周血淋巴細(xì)胞增殖的影響 取7、14、21日齡仔豬的血液淋巴細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，以MTT法測(cè)定甘草次酸(GA，100 mg·L<'-1>濃度起，系列5倍稀釋)對(duì)細(xì)胞增殖和Con A誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，100 mg·L<'-1>GA<,570>值顯著或極顯著低于其余各個(gè)濃度組和細(xì)胞對(duì)照組，低于此濃度的各個(gè)GA組A<,570>值與對(duì)照組差異不顯著。在7、14日齡仔豬淋巴細(xì)胞，各個(gè)濃度GA+ConA組A<,5

12、70>值均顯著或極顯著低于細(xì)胞對(duì)照組；而在21日齡仔豬淋巴細(xì)胞，只有100 mg·L<'-1>GA+ConA組A<,570>值顯著低于細(xì)胞對(duì)照組．提示，100 mg·L<'-1> GA抑制了體外培養(yǎng)的仔豬淋巴細(xì)胞增值，而低于此濃度GA沒(méi)有促進(jìn)淋巴細(xì)胞增值；GA對(duì)ConA誘導(dǎo)的不同日齡仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化作用具有差異性。試驗(yàn)Ⅴ甘草次酸對(duì)早期斷奶仔豬血液生化和揮發(fā)性脂肪酸的影響 12頭7日齡長(zhǎng)×大仔公豬，采用代乳粉飼養(yǎng)，適應(yīng)2 d后隨機(jī)分為對(duì)照

13、組和GA組。GA組代乳粉中添加GA200 mg·kg<'-1>，連續(xù)12d。測(cè)定仔豬平均日采食量和粗蛋白、粗脂肪、精氨酸攝入量；14、21日齡前腔靜脈采血，測(cè)定血液生化指標(biāo)和揮發(fā)性脂肪酸濃度。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，GA組仔豬平均日采食量、粗蛋白、粗脂肪、精氨酸攝入量差異不顯著；14日齡丙酸、異戊酸濃度顯著增加，21日齡丙酸顯著提高，丁酸、異戊酸顯著降低；血液尿素氮、氨、葡萄糖、總蛋白、白蛋白、總膽固醇差異不顯著。提示:代乳粉添加GA

14、200 mg·kg<'-1>可以影響仔豬的脂肪代謝，對(duì)血液生化指標(biāo)(尿素氮、氨、葡萄糖、總蛋白、白蛋白、膽固醇等)沒(méi)有顯著影響． 試驗(yàn)Ⅵ.甘草次酸對(duì)早期斷奶仔豬內(nèi)臟器官發(fā)育的影響 12頭7日齡長(zhǎng)×大仔公豬，采用代乳粉飼養(yǎng)，適應(yīng)2d后隨機(jī)均分為對(duì)照組和GA組。GA組在代乳粉中添加GA200 mg·kg<'-1>，連續(xù)12d。21日齡仔豬稱(chēng)重后處死，測(cè)定內(nèi)臟器官質(zhì)量和指數(shù)(內(nèi)臟質(zhì)量/體重)。取小腸黏膜測(cè)定蛋白質(zhì)含量；空腸上皮細(xì)胞測(cè)定