髓系腫瘤3號(hào)染色體異常受累基因的研究.pdf

1、目的:研究伴少/罕見(jiàn)3號(hào)染色體異常髓系腫瘤患者的臨床特征及其受累基因的表達(dá)。 方法: 1.報(bào)道該院診治的4例t(1；3)(p36；q21)MDS患者，并采用半定量RT-PCR方法對(duì)其中的3例患者骨髓標(biāo)本、正常胎兒組織、正常骨髓標(biāo)本、白血病細(xì)胞系等進(jìn)行了易位受累基因MEL1兩種轉(zhuǎn)錄形式表達(dá)情況的研究。 2.報(bào)道1例伴t(3；5)(q25；q34)染色體易位的MDSAML變患者，對(duì)該患者治療前后NPM1-MLF1融合

2、基因表達(dá)，NPM基因有無(wú)突變，MLF1和NPM-MLF1蛋白亞細(xì)胞定位等分子機(jī)制進(jìn)行剖析。 3.報(bào)道1例CML急性變伴t(3；21)(q26；q22)染色體易位患者，并采用半定量RT-PCR方法對(duì)其受累基因進(jìn)行了初步研究。 4.用SYBRGreenI實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法檢測(cè)了MDS患者EVI1和MDS1/EVI1基因mRNA水平表達(dá)。 結(jié)果： 1.正常人骨髓、正常胎兒組織和白血病細(xì)胞系主要表達(dá)全長(zhǎng)的M

3、EL1，而有t(1；3)(p36；q21)的MDS患者骨髓以MEL1s表達(dá)為主，或僅表達(dá)MEL1s。 2.伴t(3；5)(q25；q34)染色體易位的MDSAML變患者治療前骨髓細(xì)胞NPM-MLF1融合基因陽(yáng)性，經(jīng)誘導(dǎo)治療獲得完全緩解后轉(zhuǎn)為陰性。MLF1基因以非編碼蛋白剪接體表達(dá)為主，免疫組化顯示患者治療前骨髓細(xì)胞NPM-MLF1融合蛋白定位于細(xì)胞核，而野生型MLF1蛋白則定位于細(xì)胞質(zhì)?；颊咧委熐肮撬璨槐磉_(dá)EVI1基因，弱表達(dá)M

4、DS1/EVI1。未發(fā)現(xiàn)其NPM等位基因突變，WesternBlot未檢出bcl-2表達(dá)。 3.CML急性變伴t(3；21)(q26；q22)染色體易位患者AML1-EVI1、AML1-MDS1、AML1-EAP及EVI1基因在mRNA水平均有表達(dá)。 -1-4.部分不伴3q26易位的MDS患者也可檢出EVI1和MDS1/EVI1的異常高表達(dá)。 結(jié)論： 1.提出伴t(1；3)(p36；q21)異常的MDS應(yīng)

5、為一個(gè)獨(dú)立臨床病理遺傳學(xué)病種，推測(cè)MEL1短型轉(zhuǎn)錄形式(MEL1s)的過(guò)表達(dá)在其發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用。 2.證實(shí)伴t(3；5)(q25；q34)異常的MDSAML變發(fā)病機(jī)制是該染色體易位形成的融合基因NPM1-MLF1編碼蛋白異常定位于胞核，抑制了野生型MLF1的功能。 3.證實(shí)t(3；21)(q26；q22)導(dǎo)致形成AML1-EVI1、AML1-MDS1和AML1-EAP融合基因及EVI1基因激活，這些繼發(fā)的分子遺