AFM球形針尖的制作及癌細胞力學特性的實驗研究.pdf

1、癌癥，近幾十年來已對人類健康構(gòu)成強大威脅，雖然對于腫瘤的組織病理學診斷和放化療技術(shù)日趨成熟，但癌癥的發(fā)病機理和轉(zhuǎn)移機制等根本性問題卻尚未明晰。利用AFM在單細胞水平對癌細胞進行相關(guān)分析已成為當今癌癥研究的最新熱點，具有其它技術(shù)無法比擬的優(yōu)勢，但大多集中于AFM形貌成像等基礎研究，從機械角度出發(fā)對于癌細胞的力學特性進行分析限于研究手段等原因卻受到較少關(guān)注，而力學特性與癌細胞轉(zhuǎn)移過程息息相關(guān)。本課題正是利用自行制作的小球探針，基于AFM的N

2、anoindentation功能在液態(tài)環(huán)境下對癌細胞的力學特性進行測定，分析其對轉(zhuǎn)移的影響。
　　首先，對現(xiàn)有的應用于固體納米壓的痕三角形懸臂探針針尖進行功能化改造，擴展了AFM在生物領域的應用。利用實驗室現(xiàn)有設備，自行制作出滿足液態(tài)下對活細胞進行納米壓痕的小球探針，并利用Cleveland方法對其彈性常數(shù)進行了校準。該制作過程同樣適用于其它微米級球狀物向微米級尖狀物的粘附。
　　然后，分析了液態(tài)環(huán)境下實施活細胞納米壓痕實驗

3、所涉及的各方面條件，包括活細胞的選擇、培養(yǎng)、轉(zhuǎn)運，液態(tài)實驗環(huán)境建立，儀器的改裝，實驗的改進，操作的優(yōu)化，以及具體實驗前儀器的標定等等，每一項都關(guān)乎實驗能否順利進行。其中自行總結(jié)的液態(tài)下壓痕目標細胞快速定位方法具有很好的實用性和通用性。
　　最后，在保持細胞最佳生理活性的液態(tài)環(huán)境下，對轉(zhuǎn)移性不同的Anip-973和AGZY-83a兩種肺癌細胞進行AFM納米壓痕實驗，并利用Hertz接觸方程及應力松弛模型對實驗結(jié)果進行非線性擬合，再通