芹菜素增強(qiáng)阿司匹林對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、分類號(hào)：R7353密級(jí)：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位團(tuán)專業(yè)學(xué)位口@學(xué)校代碼：1062學(xué)號(hào)：2010602554學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)又肄簣科矢辱碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目：芹菜素增強(qiáng)阿司匹林對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究TITLEApigeninenhancestheproliferativeinhibitioneffectofaspirinoncoloncancercells一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：腫瘤學(xué)論文

2、作者：劉斌指導(dǎo)教師：巴一教授導(dǎo)師組成員：李爾廣教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中又于葡要目的：阿司匹林在結(jié)腸癌等腫瘤的防治中具有確切作用，但是長(zhǎng)期服用阿司匹林引起的胃腸道出血等副作用制約了它的臨床應(yīng)用。黃酮類化合物是一類廣泛存在于植物中的食物多酚類化合物，具有包括抗腫瘤作用在內(nèi)的多種生物活性。芹菜素是一種在蔬菜、水果、茶葉中含量豐富的黃酮類化合物，具有抗腫瘤活性，有報(bào)道顯示它可以增強(qiáng)抗腫瘤藥物的抗腫瘤作用。

3、本研究旨在觀察芹菜素能否增強(qiáng)阿司匹林的抗結(jié)腸癌作用，并探討其機(jī)制。方法：選取HT029、HCA7、Moser和DLD1這4種結(jié)腸癌細(xì)胞系，設(shè)置陰性對(duì)照組、芹菜素(10gmol／L)單藥組、阿司匹林(25、5、10mmol／L)單藥組、聯(lián)合用藥組4種處理方式。將4種細(xì)胞種植在96孔培養(yǎng)板中，按上述4種處理方式處理細(xì)胞，在芹菜素單藥組和聯(lián)合用藥組中加10gmol／L芹菜素，2小時(shí)后在阿司匹林單藥組和聯(lián)合用藥組加不同濃度(25、5、10mmo

4、lFc)阿司匹林。每種處理方式設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24、48、72小時(shí)后，在每孔中加入MTT溶液，培養(yǎng)箱中放置4小時(shí)后，完全除去培養(yǎng)基，加入DMSO溶解結(jié)晶。將培養(yǎng)板置于在酶標(biāo)儀中，檢測(cè)吸光度值，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。將Moser細(xì)胞種植在6孑L培養(yǎng)板中，不處理細(xì)胞，48小時(shí)后以裂解液裂解細(xì)胞，用SDSPAGE分離膠分離細(xì)胞中的蛋白質(zhì)并轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，用COX2的抗體和HRP結(jié)合的二抗孵育，添加ECL顯色液后收集圖像，以此來

5、檢測(cè)4種細(xì)胞系的COX一2的表達(dá)。將Moser細(xì)胞種植在6孔板中，按上述4種處理方式處理細(xì)胞，48小時(shí)后以裂解液裂解細(xì)胞，用SDS—PAGE分離膠分離細(xì)胞中的蛋白質(zhì)并轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，用COX2的抗體和HRP結(jié)合的二抗孵育，添加ECL顯色液后收集圖像，以此來檢測(cè)不同處理方式對(duì)COX2的蛋白表達(dá)的影響。將Moser細(xì)胞種植在6孔板中，用上述4種方式處理細(xì)胞，48小時(shí)后用Trizol提取細(xì)胞總RNA，進(jìn)行RTPCR，在瓊脂糖凝膠上電泳并收