溫度敏感性水凝膠的輻射合成及其對細(xì)胞培養(yǎng)和脫附的研究.pdf

1、N-異丙基丙烯酰胺水凝膠是一種溫度敏感性水凝膠。在某一臨界溫度可發(fā)生體積相變。作為一種新型的智能型生物材料其受到廣泛的關(guān)注，在藥物釋放、分離領(lǐng)域、酶的吸附、細(xì)胞培養(yǎng)等方面有重要的應(yīng)用前景。組織工程的迅猛發(fā)展已經(jīng)取得了大量的成果，但是某些方面依然存在挑戰(zhàn)。組織工程中種子細(xì)胞是一切的基礎(chǔ)。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞傳代時，傳統(tǒng)的酶解法對細(xì)胞的功能、遺傳特性有損傷，這個問題一直困擾著科技人員。Yamada<'[26]>等利用N-異丙基丙烯酰胺(N

2、IPAAm)的溫度敏感性，使細(xì)胞在臨界溫度之上時貼附在材料表面生長，溫度在臨界溫度以下時細(xì)胞脫附，改變了傳統(tǒng)的酶解脫附細(xì)胞的方法。本研究采用輻射法用NIPAAm和聚丙烯酰胺(AAm)凝膠制備用于組織工程的膜材，探索一種新的智能材料用于細(xì)胞培養(yǎng)，使其通過溫度變化達(dá)到可人工控制細(xì)胞脫附的目的。 1．本文利用輻射法合成了不同輻射強(qiáng)度，不同單體濃度的聚N-異丙基丙烯酰胺均聚物，測定了其最低臨界溫度(LCST)為33℃左右。并觀察了輻射強(qiáng)

3、度、單體濃度對粘均分子量的影響。結(jié)果表明，隨輻射強(qiáng)度及單體濃度的增大，均聚物的分子量增大。并采用直接接觸法研究了PNIPAAm均聚物的細(xì)胞毒性，結(jié)果表明其細(xì)胞毒性為0級。 2．采用輻射法合成了不同單體組成比的聚丙烯酰胺-co-N-異丙基丙烯酰胺共聚凝膠。分別用DSC法及溶漲法考察了其溫度敏感性。結(jié)果表明隨共聚物中AAm組分的增大，其LCST增大，當(dāng)AAm與NIPAAm的摩爾比為1時，其LCST超過100℃。另外隨AAm組分的增大

4、，其溶脹率也增大。 3．采用輻射法合成了不同單體組成的P(AAm-g-NIPAAm)水凝膠。并對其組成和結(jié)構(gòu)及溫敏性進(jìn)行了表征。通過DSC及721分光光度計(jì)得到其LCSI、均為31℃左右。溶脹率隨AAm的增多而增大。其核磁共振圖譜及紅外光譜圖顯示了NIPAAm的特征峰-CONH-及-CH(CH<,3>)<,2>。利用接觸角測定證明了接枝凝膠在溫度發(fā)生變化時出現(xiàn)親水-疏水的轉(zhuǎn)變。 4．細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，在P(AAm-g-NI