漢黃芩素對人乳腺癌細胞胰島素樣生長因子-1的影響.pdf

1、近年來研究表明,胰島素樣生長因子-1(IGF-1)及其受體(IGF-1R)能參與腫瘤細胞凋亡調(diào)控,是癌基因及抑癌基因發(fā)揮生物活性的關鍵環(huán)節(jié),是腫瘤治療的理想靶點。漢黃芩素(wogonin)是從黃芩根中分離出的一種植物源黃酮類化合物,可以阻斷腫瘤細胞的信號轉導通路,是一種非常有前途的、具有多靶點的潛在抗腫瘤藥物。本論文主要研究漢黃芩素的抗乳腺癌作用與IGF-1信號轉導通路的關系及其作用機制,旨在為應用漢黃芩素對乳腺癌進行預防、治療和藥理研

2、究提供理論依據(jù)和治療策略。本實驗主要從漢黃芩素體外抗腫瘤作用研究及其對人乳腺癌細胞胰島素樣生長因子-1的影響兩方面進行研究。
　　 1.以乳腺癌MCF-7細胞作為體外模型,噻唑鹽(MTT)比色法檢測漢黃芩素對乳腺癌細胞增殖活性的影響。應用流式細胞儀測定漢黃芩素對MCF-7細胞周期分布的影響。通過檢測MCF-7細胞培養(yǎng)基上清中乳酸脫氫酶釋放率來考察漢黃芩素的細胞毒性作用。應用相應的檢測試劑盒對MCF-7細胞線粒體膜電位和caspa

3、se-3的活性進行測定。結果顯示:①漢黃芩素能以劑量和時間依賴效應抑制MCF-7細胞株的增殖。②漢黃芩素能將細胞周期阻滯于G0/G1期,抑制腫瘤細胞S期的DNA合成,從而誘導MCF-7細胞凋亡。③漢黃芩素能提高線粒體膜的通透性,使線粒體膜電位下降56.55％,促使細胞色素C從線粒體向胞液中釋放,使caSpase-3的活性提高259.62％,最終導致細胞凋亡。
　　 2.采用MTT比色法測定細胞抑制率。流式細胞儀測定細胞周期分布及

4、細胞凋亡情況。免疫吸附試驗(ELISA)法檢測細胞上清液中IGF-1和IGFBP-3含量的變化。Westernblotting方法檢測漢黃芩素對IGF-1介導的PI-3K/Akt途徑和MAPK/Erk1/2信號傳導途徑的影響。結果顯示:①漢黃芩素能顯著地抑制IGF-1的促增殖作用,且抑制效果呈明顯的時間劑量依賴關系。②漢黃芩素能顯著地抑制IGF-1的抗細胞凋亡作用,將MCF-7細胞阻遏在G0/G1期。③漢黃芩素抑制IGF-1分泌的同時伴