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文檔簡介
1、目的:通過檢測白介素-1β(IL-1β)和黃芪對培養(yǎng)的氣道上皮細(xì)胞胰島素樣生長因子-1(IGF-1)表達(dá)的影響,從而探討氣道重塑與氣道炎癥之間的相互調(diào)控關(guān)系.方法:體外培養(yǎng)兔氣道上皮細(xì)胞,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對照組.實(shí)驗(yàn)分為三步:(1)觀察經(jīng)IL-1β處理后不同時(shí)間氣道上皮細(xì)胞IGF-1的表達(dá):實(shí)驗(yàn)組加入終濃度為1 ng/ml的IL-1β,對照組加入等量培養(yǎng)液,分別于4h、8h、16h、24h、48h收集培養(yǎng)上清液及貼有細(xì)胞的蓋玻片.(2)
2、觀察經(jīng)不同濃度IL-1β處理后氣道上皮細(xì)胞IGF-1的表達(dá):實(shí)驗(yàn)組(分IL-1β 0.05ng組、0.1 ng組、1 ng組、10 ng組)分別加入終濃度為0.05ng/ml、0.1ng/ml、1ng/ml、10 ng/ml的IL-1β,對照組加等量培養(yǎng)液,于16h后收集培養(yǎng)上清液及貼有細(xì)胞的蓋玻片.(3)觀察不同濃度黃芪對經(jīng)IL-1β處理后氣道上皮細(xì)胞IGF-1表達(dá)的影響:實(shí)驗(yàn)組(分黃芪50 mg組、200 mg組、500mg組)分別
3、加入終濃度為50 mg/ml、200 mg/ml、500 mg/ml的黃芪和終濃度為10 ng/ml的IL-1β,而對照組只加入終濃度為10 ng/mlIL-1β的等量培養(yǎng)液,于16h后收集培養(yǎng)上清液及貼有細(xì)胞的蓋玻片.分別采用雙抗體夾心ELISA方法和免疫細(xì)胞化學(xué)染色法測定IGF-1蛋白的表達(dá).結(jié)論:IL-1β可促進(jìn)氣道上皮細(xì)胞IGF-1的蛋白表達(dá),黃芪對上述過程有抑制作用.提示IL-1β可能通過影響氣道上皮細(xì)胞IGF-1表達(dá)促進(jìn)哮喘
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