不同濃度尿酸對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞間粘附分子-1的影響.pdf

1、目的:高尿酸血癥是引起慢性非梗阻性腎臟疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。高尿酸血癥可以引起蛋白尿、腎小球組織增生肥大、腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化,最終引起慢性腎功能衰竭。研究發(fā)現(xiàn)尿酸可以通過(guò)激活腎素.血管緊張素系統(tǒng)(RAS)、氧化應(yīng)激反應(yīng)以及產(chǎn)生炎癥介質(zhì)等途徑引起慢性非梗阻性腎病。細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)為免疫球蛋白超家族中的一種細(xì)胞粘附分子,在正常組織結(jié)構(gòu)和功能的維持、炎癥及免疫應(yīng)答等多種生理、病理過(guò)程中起主要作用。那么,ICAM-1是否參

2、與了尿酸導(dǎo)致的慢性非梗阻性腎臟疾病呢?目前并不清楚。為此,本實(shí)驗(yàn)擬用不同濃度尿酸刺激人腎小管上皮細(xì)胞,檢測(cè)sICAM-1和NF-kB的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化,擬探討不同濃度尿酸對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞間粘附分子-1的影響及其信號(hào)途徑,為尿酸導(dǎo)致慢性非梗阻性腎臟疾病的發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:以含10％胎牛血清的1640為培養(yǎng)基,在37℃培養(yǎng)箱(5％CO2)內(nèi)復(fù)蘇并傳代HK-2細(xì)胞株,實(shí)驗(yàn)主要分為以下幾個(gè)部分:(1)探討人腎小管上皮細(xì)胞在不同濃

3、度尿酸刺激下SICAM-1的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化:實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、尿酸2mg/dl組、尿酸7mg/dl組、尿酸12mg/dl組、尿酸l7mg/dl組、尿酸22mg/dl組。每組設(shè)三復(fù)空,分別于加入干預(yù)因素后12h、24h、48h,用ELISA法檢測(cè)sICAM-1表達(dá)變化；(2)探討人腎小管上皮細(xì)胞在不同濃度尿酸刺激下NF-kB的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化:實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、尿酸2mg/dl組、尿酸7mg/dl組、尿酸12mg/dl組、尿酸17mg/dl

4、組、尿酸22mg/dl組。每組設(shè)三復(fù)空,分別于加入干預(yù)因素后12h、24h、48h,用免疫組化法檢測(cè)NF-kB的表達(dá)變化。結(jié)果:(1)與空白對(duì)照組相比,在12h、24h、48h,sICAM-1在2mg/dl尿酸組、7mg/dl尿酸組、尿酸12mg/dl組表達(dá)無(wú)變化(P>0.05),而在17mg/d1尿酸組、22mg/dl尿酸組隨時(shí)間表達(dá)明顯增多(P<0.05),呈時(shí)間依賴性。(2)與空白對(duì)照組相比,在12h、24h、48h,NF-kB在