中藥復(fù)方?？奠`抗老年性癡呆作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 優(yōu)化中藥復(fù)方?？奠`的組方,探討中藥復(fù)方海康靈對Aβ致神經(jīng)細(xì)胞損傷保護(hù)的作用及作用機(jī)制;證明?？奠`對Aβ腦內(nèi)注射致癡呆動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶功能障礙的改善作用;為?？奠`抗老性年癡呆的臨床應(yīng)用,為中藥多靶點(diǎn)的作用機(jī)制提供有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 第1部分中藥復(fù)方?？奠`組方的優(yōu)化:采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,建立SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞H2O2損傷模型。通過測定細(xì)胞存活率(MTT法),檢測?？奠`復(fù)方

2、中單味藥與復(fù)方對SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
　　 第2部分中藥復(fù)方?？奠`對Aβ致神經(jīng)細(xì)胞損傷保護(hù)的作用及機(jī)制:采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,建立SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞Aβ?lián)p傷模型。通過測定細(xì)胞存活率(MTT法),檢測優(yōu)化后的?？奠`對SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用;倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),通過Hoechst染色檢測細(xì)胞凋亡。
　　 第3部分優(yōu)化后的?？奠`對Aβ腦內(nèi)注射致癡呆動(dòng)物的影響;通過對大鼠腦內(nèi)注射Aβ1

3、-40造成癡呆模型,采用Morris水迷宮觀察?？奠`對腦內(nèi)注射Aβ1-40所致障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。檢測優(yōu)化后的?？奠`對A B腦內(nèi)注射致癡呆動(dòng)物的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　 結(jié)果：
　　 第1部分:根據(jù)最佳有效劑量組建的?？奠`新復(fù)方(濃度為0.1.59g·ml-1)同單味藥和原復(fù)方比較,能減輕H2O2引起的SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞的損傷,明顯提高細(xì)胞的存活率(P＜0.01)。
　　 第2部分:根據(jù)最佳有效劑量組建的

4、海康靈新復(fù)方(濃度為0.159g·ml-1)同單味藥和原復(fù)方比較,能減輕Aβ引起的SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞的損傷,提高細(xì)胞的存活率(P＜0.01),能有效抑制Aβ致神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。
　　 第3部分:Morris水迷宮行為測試結(jié)果顯示,服用海康靈新復(fù)方的大鼠90s內(nèi)在定位航行實(shí)驗(yàn)中大鼠的逃避潛伏期和游泳距離縮短?？臻g探索實(shí)驗(yàn)中大鼠原平臺所在象限的游泳時(shí)間延長、第一次到達(dá)原平臺時(shí)間縮短、穿越原平臺的次數(shù)增加。腦組織生化指標(biāo)結(jié)果顯示,大

5、鼠預(yù)先給予?？奠`30d降低了Aβ1-40導(dǎo)致的MDA生成的增多,升高SOD和GSH-Px的活性,提高AchE活性。血液生化指標(biāo)結(jié)果顯示,預(yù)先給予大鼠?？奠`后可使血中TG、T-CHO的含量下降,HDL-C升高,提示?？奠`具有一定的降血脂、防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用。
　　 結(jié)論：
　　 ?？奠`新復(fù)方對H2O2和Aβ誘導(dǎo)的SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞損傷具有明顯保護(hù)作用。
　　 ?？奠`新復(fù)方能改善腦內(nèi)注射Aβ1-40所致障礙大