ATP介導(dǎo)Akt-mTOR-p70S6K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活促進(jìn)大鼠脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù).pdf

1、目的：作為在應(yīng)對(duì)細(xì)胞外信號(hào)、生長因子、細(xì)胞能量狀態(tài)和應(yīng)急等條件下的細(xì)胞生長、增殖、存活和分化的一個(gè)中樞性控制器，Akt/mTOR/p70S6K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路最近在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域受到了極大的關(guān)注。但是它對(duì)脊髓損傷(spinal cordinjury，SCI)后修復(fù)的影響還沒有得到很好的闡釋。三磷酸腺苷(Adenosinetriphosphate，ATP)被認(rèn)為是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的重要調(diào)節(jié)器，其在神經(jīng)系統(tǒng)損傷后的功能恢復(fù)中起著重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究外

2、源性ATP對(duì)大鼠脊髓損傷后Akt/mTOR/p70S6K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性的影響，并探討此信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在大鼠脊髓損傷后神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)以及修復(fù)中的作用。
　　 方法：采用改良Allen's打擊器制成大鼠脊髓損傷模型。137只健康成年雌性SD大鼠分為四組：SCI+ATP組(n=35)、SCI+生理鹽水組(n=35)、SCI+ATP+雷帕霉素組(n=35)和假手術(shù)組(n=32)。分別于術(shù)后1、2、3、4周采用免疫組化、Western

3、blot和實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR分析方法檢測(cè)脊髓組織中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、nestin、NeuN、NSE、NF200和GFAP蛋白以及mRNA表達(dá)的變化，對(duì)取自各SCI組4周的脊髓行HE染色作大體組織學(xué)研究，并采用BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分方法評(píng)價(jià)各組大鼠脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況。
　　 結(jié)果：假手術(shù)組大鼠脊髓中Akt/mTOR/p70S6K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分子在蛋白和mRNA水平

4、上呈低水平表達(dá)，在脊髓損傷后其表達(dá)增加。外源性ATP可顯著增強(qiáng)大鼠受損脊髓中Akt/mTOR/p70S6K信號(hào)通路分子的表達(dá)，而雷帕霉素可明顯抑制ATP誘導(dǎo)的此信號(hào)通路分子表達(dá)的上調(diào)。激活的Akt/mTOR/p70S6K信號(hào)通路可顯著增加受損脊髓組織中的nestin、NeuN、NSE和NF200的表達(dá)，相對(duì)抑制脊髓損傷后過度的反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞增生，明顯提高大鼠脊髓損傷后BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分，而雷帕霉素阻礙了ATP誘導(dǎo)的上述效應(yīng)。