脊髓水平KIF17-NR2B轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在小鼠骨癌痛形成中的作用及中醫(yī)藥干預(yù)的研究.pdf

1、目的:探討脊髓水平KIF17-NR2B轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在骨癌痛形成中的作用以及云南白藥對(duì)骨癌痛的治療作用及其機(jī)制的探討。
　　方法:C3H/HeNCrlVr雄性小鼠股骨骨髓腔注射NCTC2472纖維肉瘤細(xì)胞制作骨癌痛模型;以等體積的最小必須培養(yǎng)基(α-MEM)代替NCTC2472纖維肉瘤細(xì)胞骨髓腔內(nèi)注射制作假手術(shù)模型。用自發(fā)性抬足次數(shù)/2min、機(jī)械刺激縮足反射閾值(PWMT)和熱痛覺(jué)縮足潛伏期(PWTL)評(píng)估骨癌痛小鼠痛行為學(xué)表現(xiàn);同時(shí)

2、檢測(cè)骨癌痛小鼠脊髓背角淺層Kif17與NR2B蛋白與細(xì)胞水平的基礎(chǔ)表達(dá)規(guī)律。鞘內(nèi)給予NR2B特異性拮抗劑艾芬地爾(ifenprodil)和云南白藥給藥灌胃進(jìn)行干預(yù)。在不同時(shí)間點(diǎn)觀察小鼠痛行為學(xué)變化，取脊髓腰膨大部位(L3-L5)，分別應(yīng)用免疫組織化學(xué)和westernblot方法檢測(cè)脊髓背角淺層Kif17-NR2B轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)蛋白與細(xì)胞的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:(1)小鼠左股骨骨髓腔注射NCTC2472纖維肉瘤細(xì)胞，可以誘發(fā)骨癌痛小鼠進(jìn)行

3、性的痛行為學(xué)變化，表現(xiàn)為與假手術(shù)組比，腫瘤組術(shù)后10 d（0.85±0.30），14 d（0.85±0.16）機(jī)械刺激縮足反射閾(g)值降低(P＜0.05);腫瘤組術(shù)后10 d（12.01±4.08），14d（14.99±4.25）熱痛覺(jué)縮足潛伏期縮短(s)(P＜0.05);(2)小鼠左股骨骨髓腔注射NCTC2472纖維肉瘤細(xì)胞可導(dǎo)致腫瘤組術(shù)后14d脊髓背角淺層NR2B陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)（43.5±14.15）與蛋白表達(dá)（1.99±0.4

4、4）增高(P＜0.01);同時(shí)Kif17陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞（2.6±0.7）與蛋白表達(dá)（2.6±0.7）增高(P＜0.01);(3)艾芬地爾鞘內(nèi)注射可以改善骨癌痛小鼠的痛行為學(xué)表現(xiàn)，可以明顯抑制脊髓水平NR2B與Kif17陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)與蛋白的表達(dá)，給藥后2h，NR2B陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)（2.30±0.70）與蛋白表達(dá)（0.52±0.13）明顯下降(P＜0.01);同時(shí)Kif17陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞（2.41±0.60）與蛋白表達(dá)增高（0.49±

5、0.09）明顯下降(P＜0.01);(4)灌胃給予云南白藥可以劑量依賴性地改善骨癌痛小鼠的痛行為學(xué)，術(shù)后14 d，與腫瘤組比，可以抑制脊髓水平NR2B陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)（31.31±7.66）與蛋白表達(dá)（0.93±0.23）的表達(dá)(P＜0.05)。
　　結(jié)論:脊髓水平Kif17-NR2B轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在骨癌痛中發(fā)揮重要作用;ifenprodil可以抑制脊髓水平NR2B、Kif17蛋白與細(xì)胞的表達(dá);云南白藥可以抑制脊髓水平NR2B、Kif1