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1、目的:探討脊髓水平鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在小鼠骨癌痛發(fā)生中的作用。
方法:雄性C3H/HeN小鼠隨機(jī)分為5組:假手術(shù)對(duì)照Sham組(S組),癌痛模型對(duì)照Control組(C組)和KN93 Treat組(T1組、T2組、T3組)。C組和T組(T1、T2、T3)小鼠左側(cè)股骨遠(yuǎn)端骨髓腔接種NCTC2472纖維肉瘤細(xì)胞,建立骨癌痛模型;S組小鼠骨髓腔注入不含NCTC2472細(xì)胞的α-MEM。在術(shù)后的第14dS組
2、和C組鞘內(nèi)注射20%DMSO5μl, T1、T2、T3組分別鞘內(nèi)注射溶于20%DMSO的KN9315nmol/5μl、30nmol/5μl、60nmol/5μl。各組于接種前0d及接種后3d、5d、7d、10d、14d以及給藥后的0.5h、2h、4h、8h檢測(cè)小鼠的自發(fā)抬足次數(shù)、機(jī)械性縮足反射閾值(PWMT)和熱縮足反射潛伏期(PWTL)。并檢測(cè)接種前0d及接種后5d、7d、10d、14d以及給藥后2h時(shí)間點(diǎn)各個(gè)劑量組的脊髓腰膨大磷酸化
3、的CaMKII(p-CaMKII)蛋白水平。
結(jié)果:(1)所有小鼠在接種后3d均出現(xiàn)痛行為學(xué)改變,但腫瘤組和假手術(shù)組小鼠之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;接種后5d,所有小鼠的痛行為學(xué)指標(biāo)均恢復(fù)到接種前水平。接種后7d,腫瘤小鼠出現(xiàn)自發(fā)抬足次數(shù)升高及PWMT降低,與假手術(shù)組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);接種后10d出現(xiàn)腫瘤小鼠的PWTL較假手術(shù)小鼠縮短,并且腫瘤小鼠的痛行為學(xué)隨時(shí)間逐漸加重;p-CaMKII的表達(dá)接種后7d開始升
4、高,第10d、14d逐漸增加。(2)鞘內(nèi)給予KN9315nmol對(duì)骨癌痛小鼠痛行為無改善作用,且對(duì)p-CaMKII表達(dá)無影響,鞘內(nèi)給予KN9330nmol、60nmol能劑量依賴性減輕小鼠痛行為反應(yīng)并抑制p-CaMKII的表達(dá),給藥后0.5h2組小鼠自發(fā)抬足次數(shù)[(7.25±1.49)次、(4.12±1.36)次]比C組[(11.62±1.92)次]降低,PWMT[(1.28±0.14)g、(1.75±0.46)g]、PWTL[(14.
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