肺癌Ⅱ號對荷肺癌小鼠抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過“肺癌II號”中藥復(fù)方對荷Lewis肺癌小鼠的實(shí)驗(yàn)研究，探討該中藥復(fù)方在實(shí)驗(yàn)研究中的療效依據(jù)及其作用機(jī)制。為揭示“肺癌II號”中藥復(fù)方在臨床中治療肺癌的療效依據(jù)及其作用機(jī)制提供可靠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。 方法：將40只造模成功的皮下種植了Lewis肺癌細(xì)胞的C57BL/6J小鼠隨機(jī)等分成生理鹽水對照組、單純化療組、中藥組、中藥+化療組，每組10只，給藥12天后處死小鼠，觀察小鼠體重、瘤體、脾臟、運(yùn)用流式細(xì)胞儀分析小鼠腫瘤細(xì)胞增殖

2、周期各時相分布、計(jì)算凋亡率，腫瘤組織及肝臟組織做病理切片觀察其形態(tài)變化、用全自動血球計(jì)數(shù)儀檢測血細(xì)胞等多個檢測指標(biāo)。 結(jié)果：(1)Lung Ⅱ中藥復(fù)方可以阻止腫瘤細(xì)胞G1期向S期轉(zhuǎn)變，使DIPG1期的細(xì)胞含量升高，降低細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)，從而能起到延緩細(xì)胞增殖，抑制腫瘤生長的作用。在此方面，Lung Ⅱ中藥復(fù)方抑制腫瘤生長的療效顯著弱于環(huán)磷酰胺單用組；環(huán)磷酰胺單用組此療效又顯著弱于Lung Ⅱ中藥復(fù)方組與環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用組。在

3、阻止G1期向S期轉(zhuǎn)變，使DIPG1期的細(xì)胞含量的升高，使DIPs期的細(xì)胞含量降低，降低細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)，延緩細(xì)胞增殖，從而抑制腫瘤生長方面，Lung Ⅱ中藥復(fù)方和環(huán)磷酰胺有協(xié)同增效作用；Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用療效最好。(2)Lung Ⅱ中藥復(fù)方可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞的凋亡率(APOPTOSIS)升高，從而抑制腫瘤生長；但是此療效顯著弱于環(huán)磷酰胺單用組。在此方面，Lung Ⅱ中藥復(fù)方和環(huán)磷酰胺無協(xié)同增效作用。(3

4、)Lung Ⅱ中藥復(fù)方和環(huán)磷酰胺對降低瘤質(zhì)量、提高抑瘤率、降低瘤體積有協(xié)同增效作用。Lung Ⅱ中藥復(fù)方、環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用時可以顯著升高瘤密度。(4)Lung Ⅱ中藥復(fù)方能夠抵消環(huán)磷酰胺對脾臟的抑制、損傷作用，保持脾臟重量。Lung Ⅱ中藥復(fù)方、Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用能顯著升高脾密度。Lung Ⅱ中藥復(fù)方能協(xié)助升高脾密度。(5)各腫瘤組織病理切片觀察為小細(xì)胞低分化腫瘤細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞體積小，核大，胞漿少，異型性明顯，與原位

5、瘤組織病理形態(tài)一致，說明本課題是在成功復(fù)制荷Lewis肺癌C57BL/6J小鼠動物模型的基礎(chǔ)上開展各項(xiàng)研究。各組腫瘤及肝臟組織病理切片觀察提示：肺癌II號可能有一定的殺傷腫瘤細(xì)胞作用并可能有增強(qiáng)機(jī)體免疫作用，促進(jìn)組織修復(fù)作用。肺癌II號可能對肝臟組織無明顯損害。環(huán)磷酰胺可能有顯著的殺傷腫瘤細(xì)胞作用，但是可能顯著損害肝臟組織。(6)Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合使用可以避免環(huán)磷酰胺引起的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白數(shù)、紅細(xì)胞壓積、血小板計(jì)數(shù)過

6、度升高，提示Lung Ⅱ中藥復(fù)方有一定的避免由環(huán)磷酰胺引起的高粘血癥的作用；但是，Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合使用不能明顯避免環(huán)磷酰胺引起的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低的副作用。 結(jié)論：本課題在成功復(fù)制荷Lewis肺癌C57BL/6J小鼠動物模型的基礎(chǔ)上開展各項(xiàng)研究。Lung Ⅱ中藥復(fù)方具有明顯的抗惡性腫瘤作用，與化療藥物環(huán)磷酰胺合用治療效果更好。Lung Ⅱ中藥復(fù)方獲效的可能作用機(jī)制主要為：(1)Lung II中藥復(fù)

7、方調(diào)控腫瘤細(xì)胞G1/S位點(diǎn)，使腫瘤細(xì)胞阻滯于G1期，不再進(jìn)入有絲分裂，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到抑制腫瘤的作用。在阻止G1期向S期轉(zhuǎn)變，使DIPG1期的細(xì)胞含量升高，使DIPS期的細(xì)胞含量降低，降低細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)，延緩細(xì)胞增殖，從而抑制腫瘤生長方面，Lung Ⅱ中藥復(fù)方和環(huán)磷酰胺有協(xié)同增效作用；Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用療效最好。(2)Lung Ⅱ中藥復(fù)方和環(huán)磷酰胺對降低瘤質(zhì)量、提高抑瘤率、降低瘤體積、升高瘤密度有協(xié)

8、同增效作用。Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用時升高瘤密度可能系降低細(xì)胞間質(zhì)含量，可能抑制瘤體內(nèi)毛細(xì)血管增生等。(3)Lung Ⅱ中藥復(fù)方能夠抵消環(huán)磷酰胺對脾臟的抑制、損傷作用，保持脾臟重量；Lung Ⅱ中藥復(fù)方能夠促進(jìn)脾臟組織細(xì)胞增生，增加脾臟密度，從而增強(qiáng)其功能，增強(qiáng)機(jī)體免疫的作用。(4)LungII中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺對紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白數(shù)、紅細(xì)胞壓積、血小板計(jì)數(shù)升高的升高有拮抗作用。Lung Ⅱ中藥復(fù)方可以避免環(huán)磷酰胺引起的

9、高粘血癥，起到活血化瘀的作用，可以降低環(huán)磷酰胺對血液系統(tǒng)副作用。(5)Lung Ⅱ中藥復(fù)方不會顯著降低白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。但是，Lung Ⅱ中藥復(fù)方與環(huán)磷酰胺聯(lián)合使用不能明顯避免環(huán)磷酰胺引起的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低的副作用。本研究課題探索建立起對荷Lewis肺癌小鼠采用流式細(xì)胞術(shù)等進(jìn)行體內(nèi)中藥抗腫瘤機(jī)制的研究方法，具備實(shí)驗(yàn)周期短、成本低、可靠性高、指標(biāo)明確、客觀，重現(xiàn)性好的特點(diǎn)，荷瘤動物模型對抗腫瘤中藥的反應(yīng)與臨床反應(yīng)基