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1、目的:研究紅芪抗腫瘤的活性成分,提取純化紅芪總多糖(THPS),明確其結(jié)構(gòu);觀察紅芪總多糖單用及與環(huán)磷酰胺(CTX)合用對(duì)荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探討其機(jī)制。 方法:紅芪經(jīng)水提、醇析、酶解和Sevag法除蛋白提取THPS。用高效凝膠過(guò)濾色譜法測(cè)定THPS的純度及分子量,用苯酚-硫酸法測(cè)定糖含量,用間苯基聯(lián)苯法測(cè)定糖醛酸含量,用氣相色譜分析所含單糖組分,明確其結(jié)構(gòu)。昆明種小鼠90只,隨機(jī)分10只作為正常對(duì)照組,另80只小鼠接種S18
2、0瘤株后重新隨機(jī)分為荷瘤對(duì)照組、環(huán)磷酰胺組、THPS高、中、低不同劑量及各與CTX合用組共8組。正常對(duì)照組和荷瘤對(duì)照組給予生理鹽水,其余各組給與相應(yīng)劑量THPS及CTX治療,觀察腫瘤的體積變化。14天后處死小鼠,觀察瘤重、抑瘤率、胸腺指數(shù)和脾指數(shù);血球計(jì)數(shù)儀檢測(cè)外周血白細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞及血紅蛋白;流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞及NK細(xì)胞。 結(jié)果:1.THPS主要組分的分子量為19kD,純度為94
3、.3%。2.THPS的糖含量為39.0%,糖醛酸含量為26.5%,單糖組成成分:阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖及葡萄糖,其摩爾比為0.42∶0.53∶0.34∶1.00。 3.所有接種小鼠均有瘤結(jié)節(jié)生長(zhǎng)。4.與正常對(duì)照組比較,荷瘤小鼠胸腺指數(shù)明顯降低(P<0.01.),脾指數(shù)明顯增高(P<0.01),CD4+T細(xì)胞明顯降低(P<0.01),CD8+T細(xì)胞明顯增高(P<0.01),NK細(xì)胞明顯降低(P<0.05)。 5.與荷瘤對(duì)照組相比,中劑量
4、THPS明顯抑制小鼠S180瘤重量的增長(zhǎng)(P<0.01)及體積的增加(P<0.05),抑瘤率達(dá)27.81%;增加胸腺指數(shù)(P<0.01)和脾指數(shù)(P<0.01),提高CD4+T細(xì)胞數(shù)量(P<0.05)和NK細(xì)胞(P<0.05)。6.與環(huán)磷酰胺組相比,THPS與CTX合用后,各劑量組均能明顯減輕CTX所致的胸腺指數(shù)(P<0.01)、脾指數(shù)(P<0.01)、CD4+T細(xì)胞(P<0.01)、白細(xì)胞(P<0.01)的數(shù)量的下降;而只有中劑量的T
5、HPS與CTX合用,降低腫瘤的瘤重(P<0.05),并能明顯減輕CTX所致的CD3+T細(xì)胞(P<0.01)、CD8+T細(xì)胞(P<0.05)和NK細(xì)胞(P<0.05)的數(shù)量下降。 結(jié)論:1.可用水提、醇析、酶解、sevag法除蛋白提取THPS。 2.THPS所含單糖以葡萄糖為主,其次有甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖。3.THPS具有抑制S180瘤生長(zhǎng)作用。其抑瘤機(jī)制與調(diào)節(jié)T細(xì)胞亞群數(shù)量、提高T細(xì)胞及NK細(xì)胞介導(dǎo)的特異性與非特異性免疫應(yīng)答
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