霉酚酸酯與地塞米松對SLE療效作用的體外實驗研究.pdf

1、該實驗以系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)為對象,應用流式細胞術及PLISA法,在體外細胞細胞培養(yǎng)體系中,通過與地塞米松相對照,分別從細胞及分子水平探討了新型免疫抑制劑霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)對SLE患者炎性細胞釋放、Th細胞亞群比例改變及PBMCs凋亡的作用,以分析MMF對SLE療效作用的特點和機理.首先,分離S

2、LE患者的PBMCs,分別加MPA(為MMF在體內(nèi)的活性形式)或地塞米松刺激培養(yǎng),用ABC-ELISA法檢測培養(yǎng)上清中IL-10、IL-12、IFN-γ、sFas及sFasL的水平,用三色流式細胞術檢測培養(yǎng)細胞中CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'->T細胞、CD4<'+>IFN-γ<'->IL-10<'+>T細胞及CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'+>T細胞百分率,并用AV-FITC/PI雙標記法檢測PBMCs的

3、凋亡百分率.DEX除同樣可使SLE患者PBMCs培養(yǎng)中CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'->T細胞亞群(Th1)比例降低及凋亡增加外,與MPA的作用尚存有差異:DEX使IL-10的分泌增加,并使CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'+>T細胞亞群比例升高;DEX誘導SLE PBMCs凋亡的程度較MPA更顯著.MPA與DEX均能抑制sFas、sFasL的水平,提示MPA與DEX的誘導PBMCs凋亡的機制可能不是通過Fa

4、s-FasL途徑.因為,一般情況下,Fas/FasL高表達時,往往伴隨sFas/sFasL水平增高.,但sFas、sFasL的作用不同,sFasL能夠作用于膜Fas,誘導凋亡;而sFas則能與sFasL或膜FasL結合,抑制凋亡.故DEX對sFas分泌的抑制作用較為明顯,與其顯著地凋亡誘導作用是相一致的.總之,MPA及DEX對SLE患者Th亞群及PBMCs凋亡的作用既有相同,又存在差異,從而為臨床上聯(lián)合應用二藥以達到優(yōu)勢互補,從而更好地