辣椒胞質(zhì)雄性不育恢復(fù)性QTL定位及不同栽培環(huán)境對(duì)其影響分析.pdf

1、辣椒（Capsicum annuumL.）胞質(zhì)雄性不育(CMS)是線粒體不育基因和核不育基因共同互作形成的，該不育可以通過核內(nèi)恢復(fù)基因恢復(fù)。辣椒CMS因不能產(chǎn)生正常功能性花粉，所以在辣椒雜交種生產(chǎn)中可以省去去雄的過程，因而穩(wěn)定的不育系和強(qiáng)恢復(fù)系是制高純度和高產(chǎn)雜交種的關(guān)鍵。本研究通過以構(gòu)建的F7RIL(83-58×Perennial)113株系的群體，利用SNP、SSR、Indel、CAPs等分子標(biāo)記構(gòu)建分子遺傳圖譜，定位并分析了溫室和

2、露地兩個(gè)不同栽培環(huán)境育性恢復(fù)情況，以期得到對(duì)環(huán)境特別是對(duì)溫度敏感的QTL位點(diǎn)，以應(yīng)用于辣椒分子標(biāo)記輔助育種。本研究的內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　(1)RILs(83-58×Perennial)較高密度種內(nèi)遺傳圖譜的構(gòu)建:以包含113個(gè)株系的F7RIL(83-58×Perennial)群體為作圖群體，將多態(tài)性分子標(biāo)記在親本和群體中篩選并檢測(cè)，利用Joinmap4.0軟件以LOD≧3.0進(jìn)行標(biāo)記連鎖分析，用423個(gè)可獲得清晰目標(biāo)條帶的多態(tài)標(biāo)

3、記，構(gòu)建了一張包含17個(gè)連鎖群的密度較高的種內(nèi)圖譜，該圖譜共372個(gè)標(biāo)記，其中基于KASPar技術(shù)的SNP標(biāo)記278個(gè)，SSR標(biāo)記65個(gè)，CAPs標(biāo)記23個(gè)，Indel標(biāo)記4個(gè)，SCAR標(biāo)記1個(gè)，辣味連鎖標(biāo)記1個(gè)，圖譜跨度1407.0cM，標(biāo)記間平均距離3.78cM，每個(gè)連鎖群包含的標(biāo)記數(shù)目在5～40個(gè)，連鎖群的長(zhǎng)度在21.2 cM～183.8 cM，圖譜上的標(biāo)記都與染色體相對(duì)應(yīng)，這是辣椒中第一個(gè)報(bào)道的基于KASPar技術(shù)的SNP標(biāo)記為

4、主的圖譜。
　　(2)辣椒CMS育性恢復(fù)性調(diào)查與分析:以胞質(zhì)不育系77013A為母本，與Perennial、83-58和RIL(83-58×Perennial)113個(gè)株系群體雜交，獲得115個(gè)測(cè)交F1代，通過溫度記錄儀記錄溫度變化，選取不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)溫室和露地取樣，調(diào)查測(cè)交F1代育性恢復(fù)，溫室各取樣階段的平均溫度要低于露地1.05℃～3.31℃，溫差小1.84℃～7.76℃;溫室與露地花粉各次取樣間均呈現(xiàn)顯著差異，花粉量都隨著環(huán)境

5、溫度提高而降低，而且同一取樣時(shí)間露地的花粉量顯著低于溫室的調(diào)查值。當(dāng)環(huán)境溫度出現(xiàn)高低波動(dòng)時(shí)，測(cè)交F1代的花粉量也會(huì)相應(yīng)變化，當(dāng)向低溫變化時(shí)，花粉量會(huì)有增加趨勢(shì)。又對(duì)溫室和露地測(cè)交群體做花粉量次數(shù)分布，呈現(xiàn)數(shù)量性狀連續(xù)偏正態(tài)分布。在RIL群體中存在恢復(fù)性增效與減效位點(diǎn)的自由重組，使測(cè)交F1群體部分單株出現(xiàn)超親現(xiàn)象。
　　(3)RIL（83-58×Perennial）測(cè)交群體育性恢復(fù)性QTL定位:利用RIL遺傳圖譜對(duì)測(cè)交群體的溫室6次

6、和露地5次花粉取樣分別進(jìn)行QTL定位，檢測(cè)到1個(gè)主效恢復(fù)位點(diǎn)和7個(gè)微效QTLs，位于P1、P2、P3、P6、P7、P10和P12共7條染色體上。溫室和露地都在P6同一位置檢測(cè)到了主效恢復(fù)基因位點(diǎn)Rf,其側(cè)翼標(biāo)記間的物理距離為5.16 Mb，物理位置與Rf連鎖標(biāo)記CRF位于同一區(qū)域;不同取樣間獲得的微效QTLs有所差異，溫室各微效QTLs涉及的染色體數(shù)要多于露地。在環(huán)境溫度低于25℃時(shí)，溫室微效QTLs全為增效QTL;當(dāng)環(huán)境溫度高于25℃