CIA大鼠滑膜組織中P-P38、P-JNK通路的活化及痹腫消湯與拆方的干預作用.pdf

1、目的:檢測膠原誘導性關節(jié)炎（collagen-induced arthritis，CIA）大鼠滑膜組織中絲裂原活化蛋白激酶通路中磷酸化p38(P-P38)和磷酸化JNK（P-JNK）的表達及痹腫消湯(BiZhongXiaoDecoction，BZXD)與其拆方（按濕、熱、毒、瘀分拆方）對P38、JNK通路及CIA大鼠的影響。進一步從信號傳導通路方面探討類風濕關節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）的發(fā)病機制，闡釋從濕、熱

2、、毒、瘀論治RA的作用機制。
　　 方法:采用牛Ⅱ型膠原(collagenⅡ，CⅡ)和完全弗氏佐劑(completedfreund adjuvant，CFA)混合皮內(nèi)注射于各組大鼠足趾、尾部、背部等處復制CIA模型，再隨機分為模型組、痹腫消湯組（全方組）、清熱解毒組（拆方1組）、祛濕通絡組（拆方2組）、活血化瘀組（拆方3組），并設立正常組與之比較。模型組灌服蒸餾水，各治療組灌服相應中藥，正常組自由飲水。觀察大鼠的一般情況，體重變

3、化，關節(jié)炎指數(shù)積分，足爪腫脹度，HE染色光鏡下觀察關節(jié)滑膜的病理改變，采用免疫印跡法(Western-blot)檢測P-p38、P-JNK在各組大鼠不同時間點滑膜組織中的表達。運用Imagetool3.0灰度掃描軟件對結(jié)果進行半定量分析，利用spss(l)6.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理。
　　 結(jié)果:1、采用CⅡ混合CFA皮內(nèi)注射SD大鼠成功復制了CIA模型。CIA大鼠關節(jié)炎癥狀于初次免疫1周左右開始出現(xiàn)。與模型組比，全方組及各

4、拆方組治療1周后體重增長變快，關節(jié)炎指數(shù)積分開始下降，足爪腫脹度減輕。
　　 2、模型組HE染色見炎性細胞浸潤，血管翳形成，滑膜增厚等。各治療組經(jīng)治療后僅見少量炎性細胞和少許新生血管。
　　 3、模型組大鼠中P-p38及P-JNK表達較正常組顯著增高(P＜0.05);全方組及各拆方組中P-p38及P-JNK的表達較模型組降低(P＜0.05);各拆方組較全方組p-P38表達增強，且有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);拆方1組較拆

5、方2組、拆方3組P-P38表達顯著降低(p＜0.05);各拆方組較全方組p-JNK表達具有增強趨勢，但無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:1、以C(Ⅱ)混合CFA皮內(nèi)注射SD大鼠后出現(xiàn)關節(jié)發(fā)紅、腫脹等癥狀，成功復制了CIA動物模型，此模型具有RA代表性特點，可作為RA研究用。
　　 2、CIA大鼠中隨著關節(jié)炎癥狀加重，關節(jié)炎指數(shù)積分上升，足爪腫脹度加重，P-P38、P-JNK的表達也隨之增強提示RA滑膜組織的病變