痹腫消湯對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜AnnexinⅠ、AnnexinⅤ表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究痹腫消湯(BiZhongXiao Decoction，BZXD)對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜組織膜聯(lián)蛋白Ⅰ(AnnexinⅠ)、膜聯(lián)蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)表達(dá)的影響，探討annexin Ⅰ、annexin Ⅴ在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthrifis,RA)病變過程中的作用及痹腫消湯治療RA的機(jī)理。 方法：采用Ⅱ型膠原(collagen

2、Ⅱ，CⅡ)和完全弗氏佐劑(completedfreund adjuvant，CFA)混合皮下注射誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性大鼠關(guān)節(jié)炎模型。篩選成功動(dòng)物模型，隨機(jī)分為模型組(n=15)、痹腫消湯組(BZXD組)(n=15)。另設(shè)正常對(duì)照組(n=15)。BZXD組于初次免疫14d后灌服痹腫消湯，生藥劑量62.1g／kg·d，2次／d。模型組灌服等體積雙蒸水，正常組讓其自由飲水。觀察大鼠一般情況、體重變化、關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分、足爪腫脹度。各組大鼠分別于造模后25

3、d、35d、45d斷頭處死，進(jìn)行兩種處理：(1)取踝趾關(guān)節(jié)行HE染色，觀察各組滑膜病理形態(tài)學(xué)變化。(2)分離踝關(guān)節(jié)滑膜組織。采用免疫印跡法(Westem blot)檢測(cè)模型組、痹腫消湯組及正常組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)滑膜組織中annexinⅠ、annexin Ⅴ的表達(dá)，運(yùn)用Imagetool 3.0灰度掃描軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行半定量分析，利用spss11.0統(tǒng)計(jì)軟件包比較組間及組內(nèi)差異。 結(jié)果：1、一般情況觀察：模型組大鼠飲食減少，平均體重

4、較正常組和BZXD組減輕(P<0.05)，后期可見毛發(fā)枯燥等癥狀；痹腫消湯組、正常組大鼠活潑好動(dòng)，進(jìn)食多，毛色光澤柔軟。 2、關(guān)節(jié)炎指數(shù)積分評(píng)定結(jié)果：隨著免疫時(shí)間延長(zhǎng)，模型組與BZXD組關(guān)節(jié)炎指數(shù)增加，于25d達(dá)高峰。BZXD組在20d、25d、30d、35d、40d、45d發(fā)病程度明顯輕于模型組(P<0.05)。 3、模型組大鼠于免疫2周后足爪腫脹較正常組明顯(P<0.05)。BZXD組大鼠足爪腫脹度在治療3周后與模型

5、組相比明顯下降(P<0.05)。 4、HE染色病理學(xué)檢查結(jié)果：模型組可見大量血管翳形成，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，滑膜增厚等病理特征；痹腫消湯組可見少量新生血管及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，滑膜輕度增厚。隨時(shí)間推移，新生血管減少，炎癥逐漸減輕。 5、Western blot結(jié)果：模型組大鼠滑膜組織annexin I表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)明顯低于正常組(P<0.01)，且在25d、35d和45d水平遞減(P<0.05，P<0.01)；痹腫消湯組annexi

6、n I表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)明顯高于模型組(P0.05)。annexin I表達(dá)在25d、35d和45d水平遞增(P<0.05，P<0.01)。模型組大鼠annexin V表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)均低于正常組(P

7、、45d水平遞增，各時(shí)間點(diǎn)明顯高于模型組(P<0.01)，35d、45d水平表達(dá)明顯高于正常組(P<0.01，P<0.05)。 結(jié)論：1、以BⅡC混合CFA皮下注射成功復(fù)制CIA動(dòng)物模型。 2、在CIA病理過程中，annexin I、annexin V表達(dá)下調(diào)。提示annexin I、annexin V可能與RA病程相關(guān)。 3、痹腫消湯上調(diào)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜annexin I、annexinV表達(dá)，這可能是