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文檔簡介
1、干旱影響作物生長發(fā)育和糧食生產(chǎn)安全。研究植物抗旱的分子機(jī)制,對培育抗旱品種并解決干旱問題有重要的實際意義。miR159為調(diào)控植物生長發(fā)育的重要微小RNA,并位于ABA下游參與植物抗旱調(diào)節(jié)。然而,miR159-MYBs通路如何調(diào)控下游信號來響應(yīng)干旱的機(jī)制依然未知。本研究以擬南芥miR159缺失突變體以及miR159過表達(dá)植物為材料,通過ABA敏感性實驗和干旱脅迫實驗,結(jié)合熒光定量PCR、ChIP-qPCR和遺傳學(xué)等方法,對miR159調(diào)控
2、植物抗旱的分子機(jī)制進(jìn)行解析,取得了如下結(jié)果:
1.與Col-0相比,mir159ab雙突變體對ABA的敏感性和抗干旱能力明顯增加;干旱條件下,mir159ab雙突變體氣孔的閉合率明顯高于Col-0;熒光定量PCR結(jié)果顯示,mir159ab雙突變體中ABI5基因以及其下游基因EM1、RD19A、EM6等表達(dá)顯著上調(diào)。
2.構(gòu)建了mir159ab abi5-2三突變體。ABA敏感性實驗表明,mir159ab abi5-2
3、三突變體對ABA的敏感性明顯降低,結(jié)果更趨向于abi5-2。表明在ABA敏感性表型上,abi5-2上位于mir159ab。
3.miR159靶基因MYB33的功能缺失降低了植物對ABA的敏感性,且myb33可以回復(fù)mir159ab對ABA的超敏感性,表明MYB33在miR159介導(dǎo)的ABA敏感性中起主要功能。
4.序列分析顯示,ABI5啟動子上含有多個預(yù)測的MYB結(jié)合位點。進(jìn)一步ChIP-qPCR實驗表明,MYB33
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