5-氮雜胞苷和曲古抑菌素A對HaCaT細胞MMP-1和MMP-3表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:光老化指皮膚由于反復光暴露引起的提前老化,其特征性組織學變化是彈性組織變性物質的沉積和膠原的嗜堿性變性,伴有Ⅰ型和Ⅲ型前膠原的降解。雖然其發(fā)生機制尚未完全明了,但是基質金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)增高導致纖維結締組織的降解是引起皮膚光老化最重要的機制。在皮膚光老化的發(fā)生發(fā)展以及當前的諸多研究中,認為最重要的是基質金屬蛋白酶是MMP-1和MMP-3,也是目前的研究熱點。
  目的:<

2、br>  (1)探討HaCaT細胞MMP-1和MMP-3的表達是否受DNA甲基化的調控;
  (2)探討HaCaT細胞MMP-1和MMP-3的表達是否受組蛋白乙酰化的調控;
  (3)探討HaCaT細胞MMP-1和MMP-3的表達是否受DNA甲基化和組蛋白乙?;瘏f(xié)同作用的調控,為進一步研究皮膚光老化的表觀遺傳學機制,提供理論依據(jù)。
  方法:
  (1)體外常規(guī)培養(yǎng)人角質形成細胞株(HaCaT細胞);
  

3、(2)用5-氮雜胞苷(5-azaC)(1μmol/L)或/和曲古抑菌素A(TSA)(1μmol/L)處理HaCaT細胞;分為:5-azaC處理組、TSA處理組和5-azaC聯(lián)合TSA處理組,分別作用于HaCaT細胞0h、24h、48h、72h后提取上清和mRNA;
  (3)用Real-tinme PCR和ELISA方法分別從mRNA及蛋白的水平檢測不同藥物處理組HaCaT細胞中MMP-1/3基因的表達。
  結果:

4、  (1)用5-azaC(1μmol/L)處理HaCaT細胞24h、48h、72h后,與0h(空白對照組)作比較,HaCaT細胞MMP-1和MMP-3 mRNA水平和蛋白表達均顯著升高(P<0.05);
  (2)用TSA(1μmol/L)處理HaCaT細胞24h、48h、72h后,與0h(空白對照組)作比較,HaCaT細胞MMP-1和MMP-3 mRNA水平和蛋白表達均顯著升高(P<0.05);
  (3)用5-azaC(

5、1μmol/L)聯(lián)合TSA(1μmol/L)處理24h、48h、72h后,與0h(空白對照組)作比較,HaCaT細胞MMP-1和MMP-3 mRNA水平和蛋白表達均顯著升高(P<0.05);且與單用5-azaC或TSA處理后的不同時間點比較,24h、48h、72h的HaCaT細胞MMP-1、MMP-3 mRNA水平和蛋白表達均較高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  結論:
  (1) HaCaT細胞MMP-1和MMP-

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