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文檔簡介
1、目的:因DSIP在體內(nèi)的含量極少,分離純化十分繁瑣。本實驗?zāi)M內(nèi)源性睡眠肽,人工合成DSIP及其同系物后分析純化。研究人工合成的DSIP及其同系物是否具有促眠作用,在相同劑量下,兩者的促眠作用有什么區(qū)別。進(jìn)一步比較鼻腔給藥及靜脈給藥的促眠作用,并研究其對腦組織的毒副作用。以獲得藥效高、給藥方便、無毒副作用的促眠多肽藥物。
方法:①采用Fmoc固相合成法人工合成DSIP及其同系物,采用高效液相色譜法和質(zhì)譜法分析提純及鑒定,確定合
2、成的多肽即為設(shè)計的目的肽。②通過動物實驗觀察人工合成的DSIP及其同系物的促眠作用。首先用大鼠及新西蘭大耳白兔行為學(xué)試驗初步判定人工合成DSIP及其同系物是否有促眠作用。第二步,確認(rèn)其效果后給新西蘭大耳白兔通過靜脈注射目的肽、測定并分析腦電圖檢測人工合成的DSIP及其同系物是否具有促進(jìn)家兔睡眠的作用,比較不同劑量下的促眠作用及兩種肽的作用。第三步,比較研究DSIP及其同系物鼻腔給藥與靜脈給藥的效果。③通過病理學(xué)檢測人工合成的睡眠肽DSI
3、P及其同系物在大中劑量一定時期給藥后對腦組織細(xì)胞是否有損傷。
結(jié)果:①合成具有生物活性的人工睡眠肽DSIP及其同系物,經(jīng)高效液相色譜法純化后達(dá)到95%以上純度,最后經(jīng)質(zhì)譜法確認(rèn)。②用大鼠和新西蘭大耳白兔完成行為學(xué)試驗,初步驗證DSIP及其同系物具有促眠作用。③對新西蘭大耳白兔腦電圖數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)分析提示,靜脈給藥時,DSIP及其同系物組家兔均與生理鹽水組家兔慢波睡眠時間統(tǒng)計學(xué)有顯著性差異,給藥組慢波睡眠時間長。且在相同劑量下,靜
4、脈給藥DSIP組的慢波睡眠時間高于靜脈給藥DSIP同系物組的慢波睡眠時間。④課題組前期實驗結(jié)果表明,人工合成的睡眠肽DSIP通過15、30、45nmol/kg劑量鼻腔給藥均可得到靜注相近的促眠作用。而本組實驗結(jié)果為,鼻腔給予DSIP同系物30nmol/kg和45nmol/kg組家兔用藥前后比較統(tǒng)計學(xué)有顯著性差異,給藥后慢波睡眠時間增加。鼻腔給藥DSIP同系物30nmol/kg組家兔與靜注DSIP同系物30nmol/kg組家兔慢波睡眠時間
5、統(tǒng)計學(xué)無顯著性差異。⑤中長期靜脈給予大中劑量DSIP及其同系物,光鏡下觀察經(jīng)HE染色的大鼠腦組織切片,無明顯差異。
結(jié)論:①成功合成具有生物活性的人工睡眠肽DSIP及其同系物。②人工合成的睡眠肽DSIP及其同系物有促眠作用,且在相同劑量下,靜脈給予DSIP的慢波睡眠時間高于靜脈給予其同系物的慢波睡眠時間。③人工合成的DSIP及其同系物通過鼻腔給藥30nmol/kg即可得到靜注劑量30nmol/kg大致相同的促眠作用。④中長期大
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