玉米抗大斑病種質(zhì)的抗性基因分析.pdf

1、大斑突臍孢菌(Exserohilum turcicum)引起的玉米大斑病是世界性流行病害,目前該菌己成為影響我國玉米生產(chǎn)的主要病原菌之一.利用抗病品種是防治大斑病最為經(jīng)濟、有效的措施.玉米與玉米大斑病菌問的互作符合Flor的"基因?qū)?假說,因此可以利用基因推導方法對玉米資源進行抗大斑病基因鑒定. 隨著分子標記技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,包括玉米大斑病抗性基因在內(nèi)的許多植物抗病基因被分子定位和作圖.利用與抗病基因緊密連鎖的分子標記對抗病

2、資源進行檢測是鑒定抗病基因快速而有效的方法.本研究對100份抗大斑病玉米資源進行了抗性基因推導,分析了部分已發(fā)表的抗大斑病基因連鎖標記的實用性,利用SSR和RAPD分析技術(shù)構(gòu)建了抗大斑病基因的新的連鎖標記,并利用有效的標記檢測了抗性種質(zhì)中可能攜帶的抗性基因.主要研究結(jié)果如下: 1. 用噴霧接種法鑒定了100份抗大斑病玉米資源,通過分析寄主與病菌小種的互作模式,確認49份玉米資源攜帶Ht1基因,占供試資源的49﹪;24份攜帶Ht2

3、基因,占供試資源的24﹪;29份攜帶Ht3基因,占供試資源的29﹪;13份攜帶HtN基因,占供試資源的13﹪. 2. 利用含不同抗大斑病基因背景的黃早四近等基因系對已報道的與抗性基因Ht2連鎖的引物umc1202、bnlg1152、umc1149和SD一06<,633>,與抗性基因Ht3連鎖的引物bnlg1666進行了擴增檢測.結(jié)果發(fā)現(xiàn)這5對引物在近等基因系內(nèi)均有有效擴增,且片段大小基本一致,并未產(chǎn)生多態(tài)性擴增或與相關(guān)抗性基因背

4、景一致的特異性的擴增. 3. 利用4個成對近等基因系對29對SSR引物分別進行檢測,發(fā)現(xiàn)只有位于染色體7.04區(qū)域的引物umc1684在黃早四Ht3和黃早四這對近等基因系內(nèi)的擴增具有多態(tài)性,初步推測umc1684與Ht3連鎖. 4. 利用30條RAPD引物對黃早四近等基因系進行了擴增,發(fā)現(xiàn)引物S1004、S1008、S1009、S1012、S1013的擴增產(chǎn)生特異性條帶.對這些特異條帶進行回收、測序、引物設(shè)計、擴增檢測,