基于自組裝和原子力顯微鏡的藥物溶液下血清蛋白及其抗體的相互作用研究.pdf

1、基于自組裝和原子力顯微鏡的藥物溶液下血清蛋白及其抗體的相互作用研究念重慶大學碩士學位論文(學術學位)學生姓名：王從周指導教師：王建華教授專業(yè)：藥學學科門類：理學重慶大學生物工程學院二O一二年四月重慶大學碩士學位論文中文摘要摘要很多人類疾病都與蛋白質之間的結合／解離情況密切相關，因此從分子水平上研究蛋白質之間的相互作用在生命科學領域具有十分重要的意義。近年來，探測和表征這些蛋白質問的相互作用如何受Nd分子的影響，在藥物篩選以及醫(yī)學診斷中扮

2、演著越來越重要的角色。本文以牛血清白蛋白(BSA，抗原)和兔抗牛血清白蛋白(anti—BSA，抗體)為研究對象，以基于自組裝和原子力顯微鏡(AFM)的單分子力譜技術為主，表面等離子共振技術(SPR)為輔，考察了不同溶液環(huán)境下抗原／抗體間的相互作用。主要內容如下：通過白組裝單分子層法(SAM)法進行蛋白質固定，應用AFM進行不同溶液環(huán)境下BSA和antiBSA的粘附力測試，再通過泊松分布統(tǒng)計法計算得到BSA和antiBSA單分子對在不同溶

3、液環(huán)境下的特異性作用力(E)和非特異性作用力(而)：生理溶液下R為98pN，Fo為48pN；泰樂菌素溶液中E降至54pN；磺胺噻唑鈉溶液中凡升至90pN。利用SPR考察了不同溶液環(huán)境下BSA／antiBSA的結合／解離過程，得到了不同環(huán)境下BSA／anti—BSA的動力學參數(結合速率k。)：生理溶液中k。為707x103MdS～；泰樂菌素溶液中k。降至334x103M‘1S～；磺胺噻唑鈉溶液中k。升至897x103M。1S～。利用AF

4、M考察了不同濃度的藥物及同一類型下類似結構的藥物對于BSA／antiBSA間相互作用力的影響情況。以上結果表明大環(huán)類脂類抗生素由于其較大的分子空問結構，隨著其濃度的上升會掩蓋BSA／anti—BSA間特異性結合位點，從而降低單分子對間的E；磺胺鈉鹽類藥物隨著其濃度的上升會增加整體溶液的離子強度，降低BSA／anti—BSA間的靜電排斥力，從而增加其而；喹諾酮類抗生素作為一種結構較小的非離子型藥物，其存在和濃度對BSA／antiBSA間的