基于電紡納米纖維組織工程膽管支架體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的初步研究.pdf

1、目的:觀察不同質(zhì)量比聚乳酸/羥基乙酸(PLGA)膽總管支架在體外膽汁中質(zhì)量、外形及微觀形態(tài)變化的情況，找出在膽總管損傷中可替代膽道結(jié)構(gòu)和功能的理想質(zhì)量比的支架。并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探索可降解支架修復(fù)膽道損傷的可行性和安全性。
　　 方法:(1)用靜電紡絲方法制備不同質(zhì)量比的PLGA納米纖維膜，通過掃描電鏡觀察其微觀形貌，并測(cè)定其短期體外膽汁中降解率。(2)利用可降解的靜電紡絲PLGA納米纖維設(shè)計(jì)一種簡(jiǎn)易的膽道內(nèi)支架模型。以3頭小型豬為

2、實(shí)驗(yàn)對(duì)象，隨機(jī)分配后每一頭豬分別行不同的手術(shù)方法，第一頭及第二頭先行膽總管前壁縱形切開1.0cm，然后第一頭直接行膽總管一期縫合術(shù)，第二頭放置內(nèi)支架后行膽總管縫合恢復(fù)膽道連續(xù)性。第三頭先切除部分膽總管前壁，放置內(nèi)支架后不予縫合膽總管，構(gòu)建膽總管缺損修復(fù)模型。術(shù)后觀察動(dòng)物黃疽和膽漏情況;術(shù)后1月處死所有實(shí)驗(yàn)用豬，分別比較動(dòng)物自身術(shù)前和術(shù)后肝酶(ALT、AST、ALP)和血膽紅素的變化;觀察三頭豬大體標(biāo)本、肝臟組織病理切片HE染色、膽管損傷

3、部位病理形態(tài)學(xué)改變:包括HE染色、Masson染色和α-SMA、PCNA免疫組化。
　　 結(jié)果:(1)掃描電鏡照片顯示電紡材料為連續(xù)的納米纖維，纖維直徑均分布在200-500nm范圍內(nèi)，在短期（2周）PLGA75/25和90/10兩種比例的纖維在膽汁中沒有發(fā)生明顯的降解變形。(2)三頭豬均順利完成手術(shù)，術(shù)后無黃疸及膽漏發(fā)生。動(dòng)物肝酶(ALT、AST、ALP)和血膽紅素水平術(shù)前和術(shù)后比較無顯著性差異。三頭豬術(shù)后1月可見吻合口局部輕

4、度水腫充血，未見明顯狹窄，第一頭及第三頭豬膽管無擴(kuò)張，第二頭豬近端膽管輕度均勻擴(kuò)張。術(shù)后1月三頭豬膽管切片HE染色，鏡下均可見較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，以巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞為主，粘膜下固有層膠原纖維增生，纖維結(jié)構(gòu)紊亂，可見小血管增生，第三頭較第一、第二頭增生的膠原纖維少。三組肝臟切片鏡下均未見淤膽和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。Masson染色見術(shù)后1月膠原纖維增生伴有纖維化，排列較為紊亂，第三頭豬膠原增生程度最輕，排列相對(duì)有序，第一頭增生最為嚴(yán)重。α-SMA