明膠--透明質(zhì)酸復(fù)合納米纖維組織工程支架的構(gòu)建及其生物學(xué)評(píng)價(jià).pdf

1、靜電紡絲技術(shù)是現(xiàn)階段一種制備數(shù)十到數(shù)百納米纖維的有效方法。由于生物高分子具有良好的生物相容性，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外都對(duì)生物高分子的靜電紡絲做了大量的研究。靜電紡生物高分子在組織工程支架、組織修復(fù)等方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)靜電紡絲的方法制備明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜，并通過(guò)SEM、FTIR、XRD、熱分析、接觸角、力學(xué)性能測(cè)試分析該納米纖維的各項(xiàng)物理、化學(xué)性能。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該復(fù)合纖維的直徑隨著透明質(zhì)酸在復(fù)合體系中的比例的增加而增大

2、；在復(fù)合比例相同時(shí)，直徑隨著溶液總質(zhì)量體積比的遞增而逐漸增大。隨著透明質(zhì)酸的含量的增加，熱穩(wěn)定性下降，但親水性和力學(xué)性能均有所提高。為了提高靜電紡明膠-透明質(zhì)酸纖維的耐水性和穩(wěn)定性，出于對(duì)生物毒性的考慮選用碳化二亞胺(EDC)作為交聯(lián)劑，并對(duì)交聯(lián)后的明膠-透明質(zhì)酸納米纖維的性能進(jìn)行了研究，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)交聯(lián)的復(fù)合纖維，直徑較交聯(lián)前有所增大。交聯(lián)后纖維的脫水溫度、脫水過(guò)程的焓變、接觸角和應(yīng)力都較交聯(lián)前有所提高。通過(guò)這些測(cè)試，我們對(duì)明膠-透明

3、質(zhì)酸復(fù)合纖維交聯(lián)前后的物理、化學(xué)性質(zhì)有了基本了解，為后續(xù)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。
　　 通過(guò)在共混明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜上種植成纖維、內(nèi)皮細(xì)胞，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的黏附與增殖情況，在體外評(píng)價(jià)材料的生物相容性。通過(guò)H-E染色和SEM來(lái)檢測(cè)細(xì)胞在纖維膜上的生長(zhǎng)形態(tài)。黏附實(shí)驗(yàn)表明細(xì)胞在材料上能很好的黏附。增殖實(shí)驗(yàn)表明細(xì)胞在各種比例的納米纖維材料上的增殖情況都要好于對(duì)照組(玻片)，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)，細(xì)胞的量明顯增多。H-E染色和

4、SEM結(jié)果顯示細(xì)胞在纖維膜上能保持良好的細(xì)胞形態(tài)。明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜能為細(xì)胞提供良好的生長(zhǎng)環(huán)境，未表現(xiàn)出細(xì)胞毒性。
　　 利用靜電紡明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜作為皮膚敷料植入SD大鼠體內(nèi)，通過(guò)外表觀察和H-E染色檢測(cè)纖維膜在動(dòng)物體內(nèi)的生物相容性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，纖維膜植入SD大鼠體內(nèi)，和空白對(duì)照組具有相似的表面形態(tài)，同時(shí)均有巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生，一周以后都有大量的毛細(xì)血管產(chǎn)生，三周后上皮形成較完整。對(duì)傷口面積的測(cè)量顯示，兩