肉種雞飼用甘氨酸鋅的母體營養(yǎng)效應(yīng)及分子機(jī)理研究.pdf

1、論文研究了飼用甘氨酸鋅對肉用母種雞及其后代肉雞的生物學(xué)效應(yīng)，并探討了不同類型母源鋅對雞胚發(fā)育各階段死亡率、抗氧化能力的影響及對雞胚氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用，旨在獲得甘氨酸鋅的適宜用量，并揭示不同鋅源差異性調(diào)控雞胚發(fā)育的分子機(jī)理。
　　試驗一 甘氨酸鋅對母種雞繁殖性能和抗氧化功能的影響
　　600只39周齡嶺南黃肉用母種雞隨機(jī)分為6個組，設(shè)為對照組（基礎(chǔ)日糧組合鋅24mg/kg）、無機(jī)ZnSO4組（基礎(chǔ)日糧+80mg Zn/kg

2、）和有機(jī)Zn-Gly組（基礎(chǔ)日糧+20、40、60、80mg Zn/kg），每組含5個重復(fù)，每重復(fù)20只。預(yù)試4周，種母雞飼喂基礎(chǔ)日糧以耗竭體鋅，然后正試為期8周。常規(guī)飼養(yǎng)管理。收集最后1周種蛋貯存于18℃環(huán)境中，常規(guī)孵化。種雞飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，每重復(fù)選體重相近母種雞3只共90只，屠宰取樣分析。結(jié)果表明基礎(chǔ)日糧添加80mg/kgZn-Gly組效果最佳，主要表現(xiàn)在:
　　(1)比對照組提高了產(chǎn)蛋率、蛋重、種蛋受精率、孵化率和健雛率，降

3、低了料蛋比和破蛋率(P＜0.05);比ZnSO4組也提高了蛋重、種蛋受精率、出雛率和健雛率，降低了破蛋率(P＜0.05)。
　　(2)比對照組增高了蛋黃和蛋清、血清、肝臟和肌肉鋅含量（P＜0.05）;比ZnSO4組也增高了蛋清、肝臟和肌肉鋅含量(P＜0.05)。
　　(3)比對照組升高了血清和肝臟T-AOC水平、T-SOD和CuZn-SOD活性、肝臟MT水平，降低了肝臟MDA含量(P＜0.05);比ZnSO4組升高了血清T-

4、SOD和CuZn-SOD活性、肝臟CuZn-SOD活性和MT含量、MT和CuZn-SOD mRNA豐度(P＜0.05)。
　　此外，基礎(chǔ)日糧加鋅對蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度及蛋形指數(shù)均無顯著影響(P＞0.05)。
　　基礎(chǔ)日糧加鋅能提高母種雞組織及種蛋鋅沉積量，改善雞體的抗氧化狀態(tài)，而提高母種雞的產(chǎn)蛋性能和種蛋的孵化性能，其中以80mg/kg Zn-Gly效果最佳。
　　試驗二 母源甘氨酸鋅對雞胚發(fā)育和抗氧化功能的影響

5、　　試驗一種蛋孵化過程中，第7、17d照蛋和22d解剖死胚蛋，根據(jù)雞胚發(fā)育形態(tài)統(tǒng)計分析孵化前(1-6d)、中(7-16d)、后期(17-21d)死胚率，第9、14、19和21d每組每重復(fù)選取6個活胚，解剖采集肝臟和肌肉，于-20℃或-80℃保存后分析。結(jié)果顯示基礎(chǔ)日糧添加80mg/kg Zn-Gly效果最佳，主要表現(xiàn)在:
　　(1)比對照組降低了種蛋孵化后期和全期死胚率（P＜0.05）;比ZnSO4組也降低了后期死胚率(P＜0.0

6、5)。
　　(2)比對照組提高了9、14、19、21d肝臟和肌肉鋅含量（P＜0.05）;比ZnSO4組也提高了9、19、21d肝臟和9、14、21d肌肉鋅含量(P＜0.05)。
　　(3)比對照組增高了14d肝臟T-AOC水平和CuZn-SOD活性，19d T-SOD和CuZn-SOD活性，21d T-AOC水平、T-SOD和CuZn-SOD活性，以及9、14、19和21dMT含量，而降低了9d和19d MDA含量(P＜0.

7、05);比ZnSO4組也提高了肝臟19d CuZn-SOD活性、21d T-SOD和CuZn-SOD活性，以及9、14、19和21d MT含量(P＜0.05)。
　　(4)比對照組升高了肌肉9d T-AOC水平和CuZn-SOD活性，14、19和21dT-AOC水平、T-SOD和CuZn-SOD活性，而降低了9、19和21d MDA含量(P＜0.05);比ZnSO4組也提高了肌肉19、21d T-SOD和CuZn-SOD活性（P＜

8、0.05）。
　　母種雞基礎(chǔ)日糧加鋅能提高雞胚組織鋅沉積量，增強(qiáng)雞胚的抗氧化能力，而降低雞胚發(fā)育死亡率，其中以80mg/kg Zn-Gly的效果最佳。
　　試驗三 母源鋅對后代肉雞生產(chǎn)性能、組織鋅沉積以及抗氧化功能的影響
　　根據(jù)前期試驗獲得了母種雞飼用Zn-Gly效果最佳的80mg/kg組為試驗組，以母源80mg/kg ZnSO4組為對照組，選取這2組后代健康雛雞各400只，開展2（母源鋅處理）×2（后代日糧添加0、

9、80mg Zn/kg ZnSO4處理）因子試驗設(shè)計的飼養(yǎng)試驗，共計4組，每組含5個重復(fù)，每重復(fù)40只。第21d和60d每組每重復(fù)選取3只公雞共計60只，給水禁食12h后屠宰取樣分析。結(jié)果顯示:
　　(1)母源Zn-Gly比ZnSO4提高了肉雞后期和全期日增重并降低了死亡率(P＜0.05)，同時升高了以下指標(biāo):①21d肝臟、60d血清和肝臟鋅含量(P＜0.05);②21d和60d血清T-AOC水平，T-SOD活性及21d血清CuZn

10、-SOD活性，21d和60d肝臟T-SOD、CuZn-SOD活性和MT水平及60d肝臟T-AOC水平，21d和60d肌肉T-AOC活性（P＜0.05）;③60d血清IgM和HSP70水平（P＜0.05），而降低了以下指標(biāo):①21d、60d血清、肝臟和肌肉MDA水平(P＜0.05);②60d血清IL-1、TNF-α水平和CORT濃度(P＜0.05)。
　　(2)后代日糧加鋅比不加鋅處理提高了肉雞日增重并降低了后期和全期死亡率(P＜0

11、.05)，同時升高了以下指標(biāo):①21d、60d血清和肝臟鋅含量(P＜0.05);②21d、60d血清和肝臟及21d肌肉T-AOC水平、T-SOD和CuZn-SOD活性，21、60d肝臟MT水平及60d肌肉T-AOC水平（P＜0.05）;③21d血清IgA和IgM水平，60d血清IgG、IgM和HSP70水平（P＜0.05），而降低了以下指標(biāo):①21d、60d血清和肝臟及21d肌肉MDA水平(P＜0.05);②21和60d血清CORT、6

12、0d IL-1和TNF-α水平（P＜0.05）。
　　(3)母體鋅源與后代日糧鋅處理對以下指標(biāo)存在交互作用:①肉雞后期和全期死亡率;②21d血清、肝臟和肌肉MDA濃度;③60d血清T-SOD活性和肝臟T-AOC、T-SOD、CuZn-SOD活性;④60d血清IL-1、TNF-α、CORT和HSP70水平(P＜0.05)。
　　母源Zn-Gly同比ZnSO4能增加后代組織鋅沉積量，增強(qiáng)抗氧化、抗應(yīng)激和免疫功能，而提高增重，并降

13、低死亡率。
　　試驗四 母源鋅對氧化應(yīng)激雞胚保護(hù)作用的研究
　　在本課題組多年來研究建立的種蛋孵化后期偏高溫度處理誘導(dǎo)雞胚氧化應(yīng)激模型的基礎(chǔ)上，深入開展了母源鋅對氧化應(yīng)激雞胚損傷的保護(hù)作用研究。300只36周齡的嶺南黃肉用種母雞隨機(jī)分為3個組，設(shè)為對照組（基礎(chǔ)日糧組，含鋅24mg/kg）、無機(jī)ZnSO4組（基礎(chǔ)日糧+80mg Zn/kg）和有機(jī)Zn-Gly組（基礎(chǔ)日糧+80mg Zn/kg），每組合5個重復(fù)，每重復(fù)20只。預(yù)

14、試4周，種母雞飼喂基礎(chǔ)日糧以耗竭肉種雞體內(nèi)鋅，然后正試為期8周。收取各組最后一周的種蛋存放于18℃環(huán)境中，隨后常規(guī)孵化管理。第17d各重復(fù)選取種蛋40枚置于另一孵化箱中，給予6h的39.5℃刺激。隨機(jī)選取高溫刺激組、常溫孵化組每重復(fù)中活胚蛋14枚，共計420枚，解剖采集肝臟樣品，部分用2.5％戊二醛、4％多聚甲醛分別固定，剩余的迅速置于液氮中，后轉(zhuǎn)至-20℃或-80℃冰箱保存。分析結(jié)果表明:
　　(1)與對照組和ZnSO4組比，Z

15、n-Gly組降低了種蛋孵化后期和全期死胚率(P＜0.05)。氧化應(yīng)激處理及其與母源鋅互作對上述指標(biāo)均無顯著影響(P＞0.05)。
　　(2)雞胚氧化應(yīng)激提高了肝臟ROS、MDA、蛋白質(zhì)羰基、8-OHdG和HSP70水平（P＜0.05）。同比，母源Zn-Gly較ZnSO4降低了正常和氧化應(yīng)激雞胚肝臟中的上述指標(biāo)（P＜0.05），其中肝臟MDA和HSP70水平存在母源鋅與氧化應(yīng)激的交互作用（P＜0.05）。
　　(3)雞胚氧化應(yīng)

16、激降低了(P＜0.05)肝臟T-AOC、T-SOD、CuZn-SOD、GSH-Px和CAT活性及MT水平。同比，母源Zn-Gly較ZnSO4提高了（P＜0.05）正常和氧化應(yīng)激雞胚肝臟中的上述指標(biāo)，其中肝臟MT水平存在母源鋅與氧化應(yīng)激的交互作用(P＜0.05)。
　　(4))雞胚氧化應(yīng)激明顯損傷了肝細(xì)胞線粒體形態(tài)，降低了線粒體膜電位(P＜0.05)，升高了UCP基因表達(dá)(P＜0.05)。母源日糧加鋅處理減緩了氧化應(yīng)激對雞胚肝線粒體

17、形態(tài)的損傷程度，提高了線粒體膜電位和UCP基因表達(dá)(P＜0.05)，母源Zn-Gly效果明顯優(yōu)于ZnSO4(P＜0.05)。母源鋅與氧化應(yīng)激對雞胚肝臟UCP基因表達(dá)存在交互作用（P＜0.05）。
　　(5)雞胚氧化應(yīng)激提高了肝細(xì)胞Nrf2和Bax基因表達(dá)、caspase3活性及細(xì)胞凋亡指數(shù)(P＜0.05)，而降低了CuZn-SOD和MT基因表達(dá)（P＜0.05）。母源日糧加鋅處理增高了Nrf2、CuZn-SOD和MT基因表達(dá)（P＜0