氧化槐果堿通過(guò)抑制ERK1-2COX-2PGE2通路緩解角叉菜膠誘導(dǎo)的小鼠炎性疼痛.pdf

1、目的：觀察氧化槐果堿（Oxysophocarpine，OSC）對(duì)角叉菜膠誘導(dǎo)的炎癥性疼痛的鎮(zhèn)痛作用，并探討氧化槐果堿對(duì)ERK1/2 COX-2 PGE2通路的影響。
　　方法：1、行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法①采用二甲苯致小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)OSC的抗炎作用；②采用足趾容積測(cè)量?jī)x和機(jī)械刺痛法分別測(cè)定角叉菜膠致小鼠炎性疼痛損傷足的足趾容積和機(jī)械縮足反射閾值。
　　2、采用HE染色法對(duì)角叉菜膠致小鼠炎性疼痛損傷足組織進(jìn)行染色，觀察組織病理形態(tài)的

2、改變，并統(tǒng)計(jì)中性粒細(xì)胞數(shù)目。
　　3、采用Q-PCR法檢測(cè)角叉菜膠致小鼠炎性疼痛損傷足組織中ERK1/2、COX-2的mRNA表達(dá)水平。
　　4、采用免疫組織化學(xué)法測(cè)定 OSC對(duì)角叉菜膠致小鼠炎性疼痛損傷足組織中p-ERK1/2，COX-2免疫陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)的影響。
　　5、采用Western blot方法檢測(cè) OSC對(duì)角叉菜膠致小鼠炎性疼痛損傷足組織中ERK1/2、p-ERK1/2、COX-2蛋白含量的影響。
　

3、　6、采用ELISA法檢測(cè)OSC對(duì)角叉菜膠致小鼠炎性疼痛損傷足組織中TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE2蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1、①在小鼠耳腫脹模型中，與模型組比較，OSC可降低二甲苯致小鼠耳腫脹的耳腫脹度（P<0.01）；②在角叉菜膠致炎性痛模型中，與模型組比較，OSC可抑制小鼠損傷足足腫脹的程度（P<0.01）并提高小鼠損傷足的機(jī)械縮足反射閾值（P<0.01）。
　　2、HE染色結(jié)果顯示，與模型組比較，OSC

4、可抑制損傷足組織的水腫并減少損傷組織中中性粒細(xì)胞的數(shù)量（P<0.05）。
　　3、Q-PCR結(jié)果顯示，與模型組比較，OSC不影響損傷足組織中ERK1/2 m-RNA的表達(dá)（P>0.05），但顯著降低了COX-2的m-RNA表達(dá)水平（P<0.05）。
　　4、免疫組化結(jié)果顯示，與模型組比較，OSC顯著降低了損傷足組織中p-ERK1/2、COX-2的平均積分光密度（P<0.05），且表達(dá)集中在細(xì)胞核區(qū)域。
　　5、West

5、ern blot結(jié)果顯示，與模型組比較，OSC可使炎性痛小鼠損傷足組織中p-ERK1/2、COX-2的蛋白表達(dá)量降低（P<0.01），但對(duì)ERK1/2的蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響（P>0.05）。
　　6、ELISA結(jié)果顯示，與模型組比較，OSC顯著降低了炎性痛小鼠損傷足組織中TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2蛋白的表達(dá)（P<0.01）。
　　結(jié)論： OSC對(duì)角叉菜膠誘導(dǎo)的炎性疼痛具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其鎮(zhèn)痛機(jī)制可能與OSC調(diào)