基于NF-κB-COX-2-PGE2信號(hào)通路探討氧化槐定堿對(duì)慢性炎性疼痛的鎮(zhèn)痛作用.pdf

1、目的：觀察氧化槐定堿（oxysophoridine，OSR）對(duì)完全弗氏佐劑引起的小鼠慢性炎性疼痛的鎮(zhèn)痛作用，并探討NF-κB/COX-2/PGE2信號(hào)通路對(duì)其鎮(zhèn)痛作用的影響。
　　方法：1.行為藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法采用機(jī)械刺痛法和足趾容積測(cè)量?jī)x分別測(cè)定完全弗氏佐劑致慢性炎性疼痛小鼠損傷足的機(jī)械縮足反射閾值和足腫脹度，觀察OSR對(duì)小鼠慢性炎性疼痛鎮(zhèn)痛作用的影響。
　　2.采用qPCR方法檢測(cè)OSR對(duì)脊髓背角IκBα、p65NF-κB

2、和COX-2mRNA表達(dá)的影響。
　　3.采用Western blot方法檢測(cè)OSR對(duì)脊髓背角IKKβ、p-IKKβ、IκBα、p-IκBα、p65NF-κB、p-p65NF-κB和COX-2蛋白表達(dá)的影響。
　　4.采用ELISA方法檢測(cè)OSR對(duì)脊髓背角PGE2蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組小鼠機(jī)械縮足反射閾值在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著性降低（P<0.01）,模型組小鼠足腫脹度

3、在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)都明顯增加（P<0.01）；與模型組比較，OSR（160、80、40mg/kg）在CFA給予后1、3、5、7、12d都能增加機(jī)械縮足反射閾值（P<0.05）和降低足腫脹度（P<0.05）。
　　2.qPCR結(jié)果顯示，與模型組比較，OSR(160mg/kg)不影響脊髓背角中p65NF-κB mRNA的表達(dá)，但能顯著提高IκBαmRNA的表達(dá)（P<0.01）和降低COX-2mRNA的表達(dá)(P<0.05)。
　　

4、3.Western blot結(jié)果顯示，與模型組比較，OSR(160mg/kg)能顯著性抑制p-IKKβ（P<0.01）、p-IκBα(P<0.05)、p-p65NF-κB（P<0.01）和COX-2(P<0.01)的蛋白表達(dá)，同時(shí)顯著提高IκBα(P<0.01)的蛋白表達(dá)，但對(duì)IKKβ和p65NF-κB的蛋白表達(dá)無(wú)影響。
　　4.ELISA結(jié)果顯示，與模型組比較，OSR(160mg/kg)能顯著性抑制PGE2的蛋白表達(dá)(P<0.0