潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療脾腎陽(yáng)虛型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis,UC)是以結(jié)直腸的表淺性、非特異性炎癥病為主,伴有腸外多器官損害的疾病,病情輕重不等,多反復(fù)發(fā)作或長(zhǎng)期遷延呈慢性經(jīng)過(guò)。該病治愈難度大、治愈后復(fù)發(fā)率較高,并與結(jié)腸癌的發(fā)病存在一定的關(guān)系,被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。目前由于 UC 的病因病機(jī)尚不完全清楚,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì) UC 尚缺乏較強(qiáng)的針對(duì)性的藥物治療,中醫(yī)藥治療 UC 具有一定優(yōu)勢(shì),但目前缺乏系統(tǒng)研究,作用機(jī)制不明確。目前普遍認(rèn)

2、為免疫學(xué)異常、感染因素、氧自由基損傷等因素在 UC 的整個(gè)病程中起著重要作用。因此本文目的在于科學(xué)評(píng)價(jià)潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療脾腎陽(yáng)虛型 UC 大鼠模型的臨床療效,并從免疫學(xué)、氧自由基等方面探索潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療脾腎陽(yáng)虛型 UC的部分作用機(jī)制。
　　目的：通過(guò)對(duì) UC 大鼠結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI 分)、UC 大鼠結(jié)腸組織中MDA、SOD含量、UC大鼠血清中 IgG、SIgA 含量等療效評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行觀察,評(píng)價(jià)潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療脾腎陽(yáng)虛型 UC

3、的療效并探索其部分作用機(jī)制。
　　方法：健康雄性大鼠 90 只,隨機(jī)分為 A 組(潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療組)、B 組(美沙拉嗪治療組)、C組(生理鹽水治療組)、D組(空白對(duì)照組)。其中 A、B、C三組各25只大鼠,D組 15只大鼠。免疫復(fù)合法建立脾腎陽(yáng)虛型 UC動(dòng)物模型成功后后, A組(潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療組)按 10ml/kg體重給予潰結(jié)Ⅰ號(hào)方中藥水煎劑灌胃；B組(美沙拉嗪治療組)按 50mg/kg 劑量灌服美沙拉秦緩釋片溶液；C 組(生

4、理鹽水治療組組)按 10ml/kg體重給予生理鹽水灌胃。各組灌胃均每日一次。D組(空白對(duì)照組)不予任何干預(yù)。治療期間,各組均與常規(guī)飲食,共治療 4周。分兩次采集標(biāo)本：第一次在造模 4 周完成后,大鼠禁食 24小時(shí),隨機(jī)抽取 A、B、C組大鼠 10只,D 組 6 只,取眼球血 2ml,做 SIgA,IgG 檢測(cè),采血后頸椎脫臼法處死,立即開腹截取距肛門約 6-8cm處病變結(jié)腸,平均分為兩份,投入到事先準(zhǔn)備好的裝有 4%多聚甲醛液的瓶中,

5、4℃低溫保存。其中一份常規(guī)石蠟包埋,切片, HE 染色,光鏡下觀察；另一份做組織勻漿,檢測(cè)組織 SOD及 MDA含量。第二次標(biāo)本采集在治療滿 4周后,記錄大鼠體重,大鼠禁食 24小時(shí),所有大鼠摘眼球取血后處死,開腹取結(jié)腸。標(biāo)本采集方法及處理同第一次。檢測(cè)數(shù)據(jù)經(jīng) SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理。
　　結(jié)果：造模成功后,A、B、C三組大鼠普遍出現(xiàn)進(jìn)食量減少、體重明顯減輕、大便稀溏、黏液液膿血便或血水樣便、拱背、精神倦怠、反應(yīng)遲鈍

6、、皮毛疏松無(wú)光澤,少數(shù)出現(xiàn)了步態(tài)不穩(wěn)、嗜睡甚至衰竭貌。本階段大鼠共死亡 4 只,D 組大鼠一般狀況良好,二便量及性狀無(wú)明顯改變,飲食、活動(dòng)正常。
　　造模成功后, A、B、C三組大鼠結(jié)腸標(biāo)本 HE染色顯示：粘膜及粘膜下層高度充血、水腫,有潰瘍形成,局部可見壞死,大量嗜酸性細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn),腺體中杯狀細(xì)胞顯著減少；A、B、C三組大鼠 CMDI分較 D組顯著升高(P<0.01)。
　　造模成功后,各治療組的結(jié)腸粘膜損傷

7、指數(shù)(CMDI分)、結(jié)腸組織中 MDA、SOD含量、血清中 IgG,SIgA含量與空白對(duì)照組比較,差異有顯著意義( P<0.05)。但各治療組間的結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI分)、結(jié)腸組織中 MDA、SOD含量、血清中 IgG,SIgA含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；說(shuō)明各治療組間的發(fā)病程度相似,具有可比性( P>0.05)。
　　治療結(jié)束后,A組大鼠大便、活動(dòng)轉(zhuǎn)為正常,皮毛恢復(fù)光澤,體重明顯增加；B組大鼠大便性狀明顯好轉(zhuǎn),活動(dòng)正常,皮毛光澤

8、,體重增加；C組大便便性狀、進(jìn)食量、皮毛等無(wú)明顯改善,體重進(jìn)一步下降；D組大鼠一般狀況良好,體重明顯變化。
　　治療結(jié)束后,A、B 兩組大鼠結(jié)腸粘膜充血水腫消失,糜爛、潰瘍以及壞死基本愈合,殘存潰瘍有明顯修復(fù)性改變,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)有所緩解,C組無(wú)明顯變化；A、B兩組 CMDI評(píng)分顯著降低,與 C組比較有顯著差異(P<0.05)。
　　治療結(jié)束后,A 組、B組的血清 IgG、SlgA含量顯著減少,與 C組比較有顯著差異(

9、P<0.01)；A 組、B 組大鼠結(jié)腸組織中 MDA 含量顯著降低,與 C 組比較有極顯著差異(P<0.01)；A組大鼠結(jié)腸組織中 SOD含量明顯提高,與 B、C兩組比較均有顯著差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：潰結(jié)Ⅰ號(hào)方能顯著降低血清中 IgG、SlgA含量,可明顯改善腸粘膜超微結(jié)構(gòu),有效修復(fù) UC大鼠的結(jié)腸粘膜；明顯降低結(jié)腸組織的丙二醛含量,而且能提高超氧化物歧化酶的活性。揭示潰結(jié)Ⅰ號(hào)方治療潰瘍性結(jié)腸炎的部分機(jī)理可能是：提