盾葉薯蕷遺傳多樣性探討及皂素含量分析.pdf

1、本文首次利用擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AFLP)標(biāo)記，分析研究了楊凌種質(zhì)資源圃中5個(gè)盾葉薯蕷居群30個(gè)個(gè)體的遺傳多樣性與遺傳結(jié)構(gòu)，同時(shí)對(duì)居群的薯蕷皂素含量進(jìn)行了分析，為揭示盾葉薯蕷的遺傳多樣性和皂素含量關(guān)系提供資料。實(shí)驗(yàn)的主要結(jié)果如下： (1)篩選出9對(duì)AFLP引物，共檢測(cè)到14698條清晰可見(jiàn)的條帶，其中多態(tài)性帶12628條。平均每對(duì)引物組合可以檢測(cè)到230條多態(tài)性條帶，多態(tài)性比率85.92％。多態(tài)率最高的組合為E-ACT/M-CT

2、C(94.46％)，最低的為E-AGG/M-CTA(74.75％)。相似系數(shù)范圍0.548～0.778。結(jié)果說(shuō)咀AFLP分子標(biāo)記方法能檢測(cè)到豐富的多態(tài)性。 (2)用9對(duì)引物檢測(cè)出了5個(gè)盾葉薯蕷居群在群體間、群體內(nèi)遺傳多樣性水平。盾葉薯蕷5個(gè)居群種水平上的遺傳多樣性(Ht)為0.2331，群體間遺傳多樣性(Dst)為0.1123，群體內(nèi)遺傳多樣性(Hs)為0.1208，由此可知群體內(nèi)的遺傳多樣性占51.82％，群體間的遺傳多樣性占

3、48.18％，群體內(nèi)的遺傳多樣性大于群體間的多樣性。 Nei基因分化系數(shù)(Gst)是衡量種群遺傳分化最常用的指標(biāo)，表示在總的遺傳變異中種群間變異所占的比例，遺傳分化系數(shù)為0.4818，表明5個(gè)居群盾葉薯蕷群體間存在一定的遺傳分化?；蛄?Nm)表示基因在群體間的交換程度，Nm=0.5418表明盾葉薯蕷5個(gè)居群間基因交流處于低等水平，交流比較少。 (3)使用NTSYS-pc2.11F分析軟件對(duì)所獲數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，利用UPGM

4、A方法進(jìn)行聚類分析，得到AFLP指紋圖譜的樹狀圖。繪制的聚類圖表明不同樣品薯蕷之間遺傳距離為0.222～0.452。從圖可見(jiàn)，薯蕷居群依相似系數(shù)0.70的水平可以將所研究的30個(gè)薯蕷個(gè)體分成5組?；旧习凑瞻缀泳尤骸垢蘧尤?、湖北居群、重慶城口居群、甘肅慶城居群聚在一起。 遺傳一致度和遺傳距離分別是從相同和相反方面度量群體間遺傳關(guān)系的指標(biāo)，常用遺傳距離反映居群親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近。從表2-7中可以看出，嵐皋居群和白河居群之間的遺傳距離

5、最小(為0.0343)，與湖北之間的遺傳距離次之(為0.0458)，與重慶遺傳距離較大(為0.1787)，而與甘肅距離最遠(yuǎn)(為0.2024)。說(shuō)明嵐皋居群、白河居群和湖北居群的遺傳相似性更加一致。 根據(jù)薯蕷居群的遺傳一致度用NTSYSpc 2.11F軟件和POPGENE1.32軟件，對(duì)5個(gè)居群盾葉薯蕷進(jìn)行聚類分析，構(gòu)建聚類圖。結(jié)果顯示，單個(gè)樣品的聚類結(jié)果和居群聚類結(jié)果基本一致，遺傳距離最近的嵐皋居群和白河居群首先聚在一起，而后和

6、湖北居群相聚，接著和重慶居群聚類，地理位置較遠(yuǎn)的甘肅居群?jiǎn)为?dú)聚為一類。從兩種軟件聚類結(jié)果均可看出，盾葉薯蕷遺傳相似性比較豐富，且基本上能按照地理位置的遠(yuǎn)近進(jìn)行聚類。 (4)適宜的栽培條件和環(huán)境可以提高盾葉薯蕷中薯蕷皂素的含量，楊凌國(guó)家種質(zhì)資源圃的皂素含量明顯高于國(guó)家平均水平，且經(jīng)過(guò)栽培皂素含量有所提高。同時(shí)經(jīng)過(guò)對(duì)皂素含量分析發(fā)現(xiàn)盾葉薯蕷須根較粗時(shí)，皂素含量最高，當(dāng)須根量中等和較少時(shí)，皂素含量較高。當(dāng)盾葉薯蕷根莖分枝為三出時(shí)，皂素