香椿聯(lián)合固氮菌的篩選及回接.pdf

1、香椿 (Toona sinensis)是我國(guó)特有速生用材樹種，有著很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、藥用價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)效益。香椿耐低溫，能抗旱，對(duì)土壤的適應(yīng)性強(qiáng)，但對(duì)氮肥的需求量較大。因而種植香椿需要大面積施加氮肥。然而，大量施用化肥，不僅增加營(yíng)林成本，而且導(dǎo)致水土污染，影響健康和破壞生態(tài)平衡。因此尋找新的生物固氮途徑，增加氮素供應(yīng)水平，促進(jìn)香椿的生長(zhǎng)，是當(dāng)前香椿生產(chǎn)中亟需解決的課題，但目前還沒有對(duì)香椿固氮的研究工作的相關(guān)報(bào)道。 本研究首次

2、發(fā)現(xiàn)在香椿根系存在聯(lián)合固氮體系。利用Ashbg無氮培養(yǎng)基，從香椿根內(nèi)和根際篩選得到兩個(gè)固氮酶活性較高而且穩(wěn)定的菌株，命名為固氮菌株A1和C9，作為篩選的目標(biāo)菌株。經(jīng)生物梅里埃公司W(wǎng)IPEK32鑒定儀鑒定，A1為腸桿菌科拉恩氏菌屬水生拉恩氏菌(Rahnella aquatilis)的可能性為99％,C9為腸桿菌科中間腸桿菌(Enterobacter intermedius)的可能性為93％，初步判定屬于固氮菌屬，但還需要進(jìn)一步進(jìn)行分子生物

3、學(xué)鑒定，以便最后確定其分類學(xué)地位。 探討了不同環(huán)境因子—溫度、pH、碳源、銨濃度和滲透壓對(duì)聯(lián)合固氮菌株A1和C9的影響，發(fā)現(xiàn)A1和C9固氮菌株對(duì)環(huán)境因子都有較廣的適應(yīng)性，對(duì)溫度的適應(yīng)范圍較大，在0～50C℃范圍內(nèi)均能生長(zhǎng)，能利用多種碳源生長(zhǎng)，具有很強(qiáng)的耐銨能力，但A1菌株適合在中性偏堿的環(huán)境下生長(zhǎng)，高滲透壓對(duì)其生長(zhǎng)有強(qiáng)烈抑制作用，而C9菌株適合在中性偏酸的環(huán)境下生長(zhǎng)，對(duì)高滲透壓環(huán)境有很強(qiáng)的適應(yīng)性，但其固氮酶活性受到較大的抑制。還

4、發(fā)現(xiàn)C9菌株的固氮酶活性與其生長(zhǎng)量呈正相關(guān)，即菌株固氮酶活性越高，生長(zhǎng)越旺盛。 發(fā)現(xiàn)接種固氮菌肥對(duì)香椿幼苗的生長(zhǎng)和N、P、K含量的提高有明顯的促進(jìn)作用，原因是聯(lián)合固氮菌發(fā)揮了其固氮作用，促進(jìn)宿主根系生長(zhǎng)和對(duì)水分及多種礦物質(zhì)的吸收，其具體機(jī)理還需進(jìn)一步研究。不同的處理效果存在差異：C9菌株處理比用A1菌株回接處理效果更好；種子發(fā)芽期接種固氮菌肥，生長(zhǎng)效應(yīng)明顯優(yōu)于幼苗期追施固氮菌肥；選擇竹炭作為固氮菌肥載體比起以珍珠巖為固氮菌肥載體