甘蔗內(nèi)生固氮菌的分離與鑒定.pdf

1、甘蔗糖業(yè)是廣西的重要經(jīng)濟(jì)支柱之一，甘蔗生物固氮及其應(yīng)用的研究對于在甘蔗生產(chǎn)中節(jié)約氮肥成本、減少環(huán)境污染具有非常重要的意義。甘蔗的生物固氮在巴西開展了較為系統(tǒng)深入的研究，一百多種與甘蔗聯(lián)合固氮的細(xì)菌已經(jīng)被分離得到，然而沒有系統(tǒng)地歸類；不同地區(qū)不同品種的甘蔗固氮能力存在較大差異，所得到的內(nèi)生固氮菌也不同。 本實(shí)驗(yàn)以106個(gè)甘蔗品種為材料，從其中的12個(gè)中篩選分離得到二十二個(gè)具有較高的將乙炔還原成乙烯能力的菌株。對這些菌株進(jìn)行了形

2、態(tài)學(xué)的觀察、碳源利用的測定、生理生化測定、生長因子測定以及部分菌株16Sr RNA基因序列的鑒定，結(jié)果表明： 1．所有菌株都能在液體和固體培養(yǎng)基中生長，菌落形態(tài)多為圓形或橢圓型，菌落致密，表面光滑有光澤，呈粘稠狀，淺黃色或無色，半透明，無氣生菌絲，菌落的直徑大小不同，從1～2mm至4～6mm不等。 2．24個(gè)菌株中有18個(gè)為格蘭氏染色陰性，4個(gè)為陽性。大部分細(xì)菌能利用單糖類和醇類作為碳源，厭氧或兼性厭氧；淀粉酶、尿酶、氧

3、化酶、明膠水解、硝酸還原、檸檬酸鹽的利用、產(chǎn)生H<,2>S、產(chǎn)生吲哚等生理生化指標(biāo)則各有不同。 3．所分離到的菌株都能在較大范圍的鹽濃度、糖濃度、溫度和pH值下生長，在含鹽量0-12％，含糖量0～35％之間，溫度15～40℃以及pH4～10之間均能正常生長。 4．利用16S rRNA基因克隆將其中的6個(gè)具有代表性的菌株進(jìn)行鑒定，相互之間可非常明顯地鑒別開來。將其中的4個(gè)菌株測序表明，CP74-2005、廣12大屬于腸