病毒性心肌炎中Th17細(xì)胞誘導(dǎo)的性別差異性及其機(jī)制.pdf

1、病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是一類臨床上常見的心血管系統(tǒng)疾病，主要由柯薩奇病毒B3型(CVB3)感染造成，目前已成為青少年心源性猝死的主要原因。VMC發(fā)病具有較明顯的性別差異，其中男性好發(fā)、病情嚴(yán)重，目前導(dǎo)致該發(fā)病的性別差異機(jī)制尚不明確。
　　 在本研究中，我們首先探討了CVB3感染雌雄小鼠病毒性心肌炎的發(fā)病情況，結(jié)果顯示雄性小鼠心肌組織出現(xiàn)彌漫性炎癥和壞死灶，心肌損傷血清學(xué)指標(biāo)顯著上升，心肌炎發(fā)病

2、率及死亡率均顯著高于雌性，提示雌雄小鼠對于CVB3誘導(dǎo)的心肌炎呈現(xiàn)不同敏感性。為了探討該心肌炎差異性誘導(dǎo)的機(jī)制，我們分析了CVB3感染小鼠脾臟T細(xì)胞亞群(Th1、Th2、Th17、Treg)標(biāo)志性細(xì)胞因子(IFN-γ、 IL-4、IL-17、Foxp3)的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)在雌雄小鼠間IL-17的表達(dá)差異最為顯著(P＜0.05)。同時(shí)流式結(jié)果顯示，雄性脾臟Th17(CD4+IL-17+)百分比為2.34％，顯著高于雌性的0.92％，上調(diào)約2

3、.55倍，且該上調(diào)效應(yīng)存在明顯的病毒劑量依賴性。進(jìn)一步分析脾臟Th17比例改變與病毒性心肌炎疾病進(jìn)程、嚴(yán)重程度間的相關(guān)性后發(fā)現(xiàn)，雄性小鼠脾臟Th17于病毒感染后第5天即出現(xiàn)明顯上調(diào)趨勢，至感染第7天其比例達(dá)到高峰約2.5％，顯著高于感染前的0.5％(P＜0.05)。該動(dòng)態(tài)變化曲線與病毒性心肌炎的疾病進(jìn)程高度一致，且與心肌炎嚴(yán)重程度指標(biāo)體重減輕率、心肌病理評分呈現(xiàn)正相關(guān)，其中與心肌病理評分的r2值高達(dá)0.78。上述結(jié)果充分說明，對病毒性心

4、肌炎敏感性不同的雌雄小鼠差異性誘導(dǎo)了Th17細(xì)胞，并且后者在病毒性心肌炎發(fā)病過程中扮演了重要角色。
　　 隨后，我們分析了心肌炎小鼠脾臟局部參與Th17分化發(fā)育的重要細(xì)胞因子如TGF-β、IL-6、IL-21、IL-22以及轉(zhuǎn)錄因子RORγt和RORα的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:正常雌雄小鼠上述分子表達(dá)未見差異，而在CVB3感染7天后，雄性小鼠脾臟IL-6、IL-21、IL-22、RORγt和RORα等表達(dá)較雌性顯著上調(diào)，提示雄性脾臟

5、免疫微環(huán)境更易誘導(dǎo)Th17細(xì)胞產(chǎn)生。那么，心肌炎中Th17性別差異性誘導(dǎo)分化是否由性激素不同而導(dǎo)致呢？我們向感染雄小鼠體內(nèi)注射雌激素，發(fā)現(xiàn)其脾臟Th17比例下調(diào)約3.3倍，同時(shí)心肌炎癥浸潤和壞死明顯減少，生存率大幅上升(30％ vs 80％)，提示雌激素可通過下調(diào)Th17進(jìn)而保護(hù)心肌炎。而當(dāng)向雌小鼠注射雄激素后，并未見到Th17比例的顯著改變，同時(shí)心肌病理改變及生存率也無明顯變化，提示雄激素可能未參與Th17細(xì)胞的分化發(fā)育。