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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本研究旨在觀察胃癌相關(guān)幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)的遺傳聚集性,檢測(cè)不同Hp菌株誘導(dǎo)AGS細(xì)胞染色體損傷的差異,初步探討Hp進(jìn)化起源對(duì)胃癌發(fā)生的影響。
方法:分離培養(yǎng)43株Hp(21株為胃癌相關(guān)菌株)。應(yīng)用PCR方法特異性擴(kuò)增cagA、vacA,檢測(cè)胃癌和胃炎菌株的毒力基因型分布情況。采用多位點(diǎn)序列分型方法,特異性擴(kuò)增7個(gè)Hp管家基因并測(cè)序,用MEGA軟件構(gòu)建Neighbor-joini
2、ng進(jìn)化樹進(jìn)行遺傳聚集性分析。從每個(gè)進(jìn)化分組中選取2株Hp,胃炎和胃癌菌株各1株,連續(xù)感染AGS細(xì)胞48h,檢測(cè)染色體損傷情況。
結(jié)果:對(duì)43株Hp的毒力基因分析發(fā)現(xiàn),幾乎全部胃炎和胃癌菌株均為cagA+菌株(P>0.05),胃炎和胃癌菌株的vacA基因型分布也基本相同(vacAs1/ml分別為50%,52.4%,P>0.05),提示東亞Hp毒力基因型與胃癌發(fā)生無關(guān)。而進(jìn)化分析結(jié)果表明,43株Hp可分為2組,組Ⅰ中大多為胃
3、癌菌株(16/25,64%),組Ⅱ中大多為胃炎菌株,僅有27.8%為胃癌菌株。這表明胃癌菌株呈現(xiàn)明顯的遺傳聚集性。Hp菌株誘導(dǎo)AGS細(xì)胞染色體斷裂實(shí)驗(yàn)表明,來自組Ⅰ的菌株誘導(dǎo)染色體斷裂的能力(27%)明顯高于組Ⅱ中的菌株(12%),且組Ⅰ的菌株誘導(dǎo)染色體發(fā)生麻花樣畸變。這一結(jié)果表明不同進(jìn)化起源的菌株誘導(dǎo)染色體發(fā)生斷裂的能力不同。
結(jié)論:胃癌相關(guān)菌株的聚集性表明胃炎和胃癌菌株可能具有不同的進(jìn)化起源,不同進(jìn)化起源的菌株誘導(dǎo)染色
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