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1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文孕牛乳汁中早孕因子的分離純化及部分特性的研究姓名:張宏玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:于文會(huì)20080620AbstractEarlypregnancyfactorSeparation,PurificationandIdentificationfromPregnantCows’MilkAbstractTheearlypregnancyfactor(EPF)WaSseparatedandpurifie
2、dbycelluloseionexchangechromatography,sephadexgelchromatographyandaffinitychromatographfrommilkofpregnantCOWS,tOgainthehighlypurifiedEPF,andtrytomakeantiEPFmonoclonalantibodyatfirststageExperimentalMethods:Milkoffourmont
3、hpregnantCOWSWaSgatheredanddegreasedbyhypothermyfreezingcentrifugationThedegreasedmilkwasseparatedandpurifiedbyammoniumsulfatefractionationsalting—out,DEAE52celluloseionexchangechromatography,G—100dextrangelchromatograph
4、y,ConASepharoseFF6BaffinitychromatographytechnologyinturntoobtainEPFofhighpurityTheEPFactivitiesofvariousstagesweredetectedbyrosettesuppressiontestMolecularweightofEPFwasexaminedbySDS—polyacrylamidegelelectrophoresis1soe
5、lectricpointofEPFwasexaminedbypolyacrylamidegelisoelectricfocusingelectrophoresisExperimentalResults:Afterion—exchangechromatographyandrosettesuppressiontest,theEPFactivityofeveryreceivedpeakwasdetected,withtheresultthat
6、peakofEPFactivityisDE—IAfterdextrangelchromatographyandrosettesuppressiontest。t11eEPFactivityofevel’yreceivedpeakwasdetectedwiththeresultthatpeakofEPFactivityisG111C—Icomponentof06800mgWasobtainedbyaffinitychromatography
7、technologyfrom400mlmilkofpregnantCOWSTwoproteinbandscanbeseenafterSDS—polyacrylamidegelelectrophoresiswiththerelativeolecularweightof2I0kDa,670kDaandisoelectricpointof680Conclusion:Thisresearchindicatedthattheseparationa
8、ndpurificationtechnical1outeofearlypregnancyfactorisfeasible,earlypregnancyfactorsofhighpuritywereobtainedKeywords:pregnantcows;milk;earlypregnancyfactor;separationandpurificationCandidate:ZhangHonglingSpeciality:clinica
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