核桃青皮PPO的分離純化及部分酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、多酚氧化酶是一種末端氧化酶，普遍存在于植物體內(nèi)的非線粒體中。新鮮水果、蔬菜容易發(fā)生褐變，主要和其體內(nèi)的多酚氧化酶有關(guān)。核桃青皮作為核桃生產(chǎn)中的副產(chǎn)品，利用的非常少，我國(guó)的核桃生產(chǎn)量大，所以其青皮的產(chǎn)量也高，如果不加以利用，一方面是對(duì)資源的浪費(fèi)，另一方面也會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。因此本文以核桃青皮為研究對(duì)象，用丙酮沉淀、金屬螯合親和層析的方法對(duì)核桃青皮PPO進(jìn)行分離純化，通過(guò) Native-PAGE電泳進(jìn)行純度鑒定；同時(shí)對(duì)核桃青皮PPO的部分酶

2、學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究，以期為核桃青皮的回收利用提供理論依據(jù)，主要研究結(jié)果如下：
　　1．確定了核桃青皮 PPO粗酶液的最佳提取條件：PVP添加量為1.0％，提取時(shí)間4 h，料液比為1:3；影響核桃青皮 PPO粗酶液提取率的主要因素是提取時(shí)間，其次是PVP添加量。
　　2．核桃青皮 PPO經(jīng)過(guò)丙酮沉淀、金屬螯合親和層析后，純化了1.42倍，回收率為0.23%。通過(guò) Native-PAGE電泳的方法對(duì)提純的 PPO進(jìn)行純度鑒定，發(fā)現(xiàn)核

3、桃青皮PPO有3種同工酶。
　　3．對(duì)核桃青皮 PPO的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了初步研究。以鄰苯二酚為底物，研究了 pH、溫度、抑制劑、Cu2+對(duì)其活性的影響以及 PPO的熱穩(wěn)定性等。研究結(jié)果顯示，核桃青皮 PPO的最適 pH是6.0，最適溫度是20℃，抗壞血酸對(duì)其抑制作用比較顯著；亞硫酸氫鈉和檸檬酸對(duì)核桃青皮 PPO的活性也有抑制作用，前者的抑制作用強(qiáng)于后者，當(dāng)濃度小于10 mmol/L的時(shí)候，檸檬酸對(duì) PPO幾乎沒(méi)有抑制效果。銅離子只有