生長抑素受體在膽囊癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：觀察SST及SSTR對(duì)膽囊癌組織細(xì)胞凋亡的影響；觀察SST及SSTR對(duì)膽囊癌組織細(xì)胞周期的影響；初步探討SST及SSTR在對(duì)膽囊癌細(xì)胞株周期阻滯的分子生物學(xué)機(jī)制。 方法：(1）選取人膽囊癌細(xì)胞株GBC-SD，常規(guī)體外培養(yǎng)，并裸鼠成瘤。（2）以75ug/L生長抑素加入GBC-SD細(xì)胞中，分別培養(yǎng)12h、24h及36h后，流式檢測細(xì)胞對(duì)照組及加藥作用后的周期和凋亡的變化。(3)免疫組化檢測生長抑素受體亞型在膽囊癌細(xì)胞株及裸鼠成

2、瘤組織中的表達(dá)情況。（4）免疫組化方法檢測22例膽囊癌及14例非癌膽囊組織的生長抑素受體的表達(dá)，分析受體的優(yōu)勢表達(dá)，及各受體在癌與非癌中的表達(dá)差異性，并分析受體的表達(dá)與組織分化程度的關(guān)系。（5）RT-PCR方法檢測SST作用于膽囊癌細(xì)胞株GBC-SD后SSTR3核酸的表達(dá)變化。 結(jié)果：(1）GBC-SD細(xì)胞在體外常規(guī)培養(yǎng)，生長旺盛；裸鼠接種4周后可見明顯荷瘤，病理切片鏡下見腺癌組。（2）流式檢測免膽囊癌細(xì)胞株的周期及凋亡的變化，

3、發(fā)現(xiàn)GBC-SD細(xì)胞經(jīng)75ug/L生長抑素分別作用12h、24h及36h后，在生長抑素作用24h時(shí)，細(xì)胞阻滯于S期的細(xì)胞最多（P<0.05），隨后就開始減少細(xì)。而細(xì)胞的凋亡并沒有明顯的變化，僅有增加的趨勢（P>0.05）。（3）疫組化檢測發(fā)現(xiàn)在GBC-SD細(xì)胞株及成瘤組織中SSTR亞型蛋白的表達(dá)SSTR3>SSTR2，SSTR5>SSTR1。（4）免疫組化檢測癌與非癌組織中發(fā)現(xiàn)SSTR1、2、3、5四種亞型在膽囊癌組織和正常膽囊粘膜均有

4、表達(dá)，且SSTR表達(dá)的優(yōu)勢都是SSTR3，膽囊癌中SSTR5的表達(dá)明顯高于正常膽囊粘膜（P<0.05）；SSTR3及SSTR5在惡性度高的膽囊癌中表達(dá)降低；（5）RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)生長抑素作用GBC-SD細(xì)胞株后，SSTR 3的表達(dá)上調(diào)。 結(jié)論：膽囊癌細(xì)胞及組織中SSTR1、2、3、5亞型均有表達(dá)；生長抑素對(duì)膽囊癌細(xì)胞周期有明顯抑制作用，在24h抑制作用最強(qiáng)；生長抑素對(duì)膽囊癌細(xì)胞凋亡沒有明顯作用；生長抑素能上調(diào)SSTR3的表達(dá)