月經(jīng)病虛寒證Ⅰ-Ⅱ型T淋巴細(xì)胞、生殖激素水平的變化及《金匱要略》溫經(jīng)湯對(duì)其影響.pdf

1、目的：虛寒證在人群中患病率高達(dá)9.95％，且女性(13.21％)明顯高于男性(5.56％)。虛寒可引起月經(jīng)后期、月經(jīng)量少、痛經(jīng)、閉經(jīng)等多種月經(jīng)病，嚴(yán)重影響著婦女的身心健康。目前關(guān)于月經(jīng)病虛寒證的研究較少，西醫(yī)對(duì)本病證尚缺乏令人滿意的治療措施。因此，深入研究月經(jīng)病虛寒證的發(fā)生機(jī)制，為臨床婦科虛寒證的診治提供幫助，就成為亟待解決的問題。本課題通過研究I/II型T淋巴細(xì)胞和生殖激素與虛寒型月經(jīng)病的關(guān)系，并與虛熱型月經(jīng)病進(jìn)行比較，從內(nèi)分泌。免疫

2、方面初步探討月經(jīng)病虛寒證的部分發(fā)病機(jī)理及《金匱要略》溫經(jīng)湯(簡稱“金匱溫經(jīng)湯”)對(duì)其治療的作用機(jī)制，以期為中醫(yī)證候的客觀化研究及辨證論治提供依據(jù)。 方法：按就診先后順序選擇符合月經(jīng)病虛寒證和虛熱證納入標(biāo)準(zhǔn)的患者各30例，分別為月經(jīng)病虛寒證組(簡稱“虛寒組”)、月經(jīng)病虛熱證組(簡稱“虛熱組”)。選取正常健康女性志愿者30例為正常組(除外心腦血管疾病，肝、腎、腎上腺、甲狀腺、垂體等其它內(nèi)分泌疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病，血液病等)。虛寒組中痛

3、經(jīng)10例，月經(jīng)后期12例，月經(jīng)過少8例；年齡最大44歲，最小22歲，平均年齡29.77±5.75歲；病程最長11年，最短1年，平均3.88±2.58；病情評(píng)分最高為38分，最低為6分，平均為19.63±8.82分。虛熱組年齡最大42歲，最小18歲，平均年齡29.53±6.37歲；病程最長11年，最短1年，平均3.38±2.21年；病情評(píng)分最高為36分，最低為8分，平均為20.40±7.51分。正常組年齡最大40歲，最小20歲，平均年齡2

4、8.57±6.02歲。虛寒組與虛熱組之間病程長短、病情評(píng)分比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。虛寒組、虛熱組、正常組三組之間年齡比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性。運(yùn)用金匱溫經(jīng)湯對(duì)虛寒組進(jìn)行治療，每日一劑，分兩次口服，連用3個(gè)月經(jīng)周期，每個(gè)月經(jīng)周期為一個(gè)療程觀察期間不得服用與本病證有關(guān)的其他中西藥物。三組(虛寒組治療前后、虛熱組治療前、正常組)分別于月經(jīng)周期第二天清晨取坐位，采空腹肘靜脈血6ml，其中1ml血EDTA抗凝混勻，剩余5ml置于另一無菌含肝素抗凝劑

5、的塑料試管中，混勻，3000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上層血清置-20℃冰箱保存待測。采用放射免疫分析法測定血清孕酮(P)、雌二醇(E2)、睪酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)的含量，采用免疫熒光抗體標(biāo)記和流式細(xì)胞儀檢測外周血Ⅰ/Ⅱ型T淋巴細(xì)胞，應(yīng)用軟件Cellquest進(jìn)行三色熒光參數(shù)獲取。 結(jié)果： 1.月經(jīng)病虛寒證患者治療前Ⅰ/Ⅱ型T淋巴細(xì)胞與生殖激素的變化1.1 月經(jīng)病虛寒證患者外周血治療前Ⅰ/Ⅱ型T

6、淋巴細(xì)胞的變化與正常組相比，虛寒組患者治療前外周血中CD3+T、CD3+CD8+T、Th2、Yh2/Th1、Tc2、TC1細(xì)胞的含量降低(P<0.01)，Tc2/Tc1降低(P<0.05)；CD3+CD4+T細(xì)胞含量升高(P<0.05)，CD3+CD4+T/CD3+CD8+T、Th1升高(P<0.01)。 其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與正常組相比，虛熱組患者治療前外周血中CD3+T、CD3+CD8+T、Tcl細(xì)胞的含量降低(P<0.0

7、1)，CD3+CD4+T、Th1細(xì)胞含量降低(P<0.05)；Th2/Th1、Tc2升高(P<0.05)，Tc2/Tc1升高(P<0.01)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD3+CD4+T/CD3+CD8+T、Th2有升高趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 與虛熱組治療前相比，虛寒組治療前CD3+T細(xì)胞的含量變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；CD3+CD4+T、CD3+CD4+T/CD3+CD8+T、Th1細(xì)胞含量升高(P<0.01)，

8、Tc1升高(P<0.05)；CD3+CD8+T、Th2、Th2/Th1、Tc2、Tc2/Tc1細(xì)胞含量降低(P<0.01)，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 1.2 治療前月經(jīng)病虛寒證患者血清生殖激素水平的變化與正常組相比，虛寒組治療前患者血清中E2、LH的含量降低(P<0.05)，T、FSH的含量顯著降低(P<0.01)，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P的含量有降低趨勢(P>0.05)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義與正常組相比，虛熱組患者治療前血清中T、LH

9、的含量升高(P<0.05)，P的含量顯著升高(P<0.01)，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FSH、E2的含量有升高趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 與虛熱組治療前相比，虛寒組患者治療前血清中E2的含量降低(P<0.05)，T、P、FSH、LH的含量顯著降低(P<0.01)，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 1.3 治療前月經(jīng)病虛寒證患者Ⅰ/Ⅱ型T淋巴細(xì)胞與生殖激素的相關(guān)關(guān)系治療前虛寒證患者Th2、Tc2、Th1、Tc1細(xì)胞與E2、

10、T、FSH有相關(guān)關(guān)系，與血清P、LH無明顯相關(guān)性。結(jié)果顯示：Th2細(xì)胞、Th2/Th1與E2呈顯著正相關(guān)(r=0.545，P<0.01；r=0.580，P<0.01)，Th1細(xì)胞與E2呈負(fù)相關(guān)(r=-0.456，P<0.05)，Th2、Tc2細(xì)胞、Th2/Th1與T呈正相關(guān)(r=0.549，P<0.01；r=0.509，P<0.01；r=0.399，P<0.05)，Th1細(xì)胞與FSH呈負(fù)相關(guān)(r=-0.399，P<0.05)。 2 月經(jīng)

11、病虛寒證治療結(jié)果運(yùn)用金匱溫經(jīng)湯治療三個(gè)療程后，臨床治愈14例，有效11例，有效率83.3％。進(jìn)一步按病種統(tǒng)計(jì)，痛經(jīng)組10例，臨床治愈5例，有效3例，無效2例，有效率80％；月經(jīng)后期組12例，臨床治愈5例，有效5例，無效2例，有效率83.3％；月經(jīng)過少組8例，臨床治愈4例，有效3例，無效1例，有效率87.5％。三種病種間有效率的比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.金匱溫經(jīng)湯對(duì)月經(jīng)病虛寒證患者Ⅰ/Ⅱ型T淋巴細(xì)胞、生殖激素的影響虛

12、寒組患者給予金匱溫經(jīng)湯治療三個(gè)療程后，與治療前相比CD3+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、Tc2細(xì)胞、TC1細(xì)胞升高(P<0.01)，Th2細(xì)胞、Th2/Th1、Tc2/Tc1升高(P<0.05)，CD3+CD4+T、CD3+CD4+T/CD3+CD8+T、Th1細(xì)胞降低(P<0.01)，E2、T、LH、FSH的含量升高(P<0.05)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P的含量有升高趨勢，但與治療前比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 與正常組比

13、金匱溫經(jīng)湯治療三個(gè)療程后CD3+T細(xì)胞低(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各指標(biāo)變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 1.本研究發(fā)現(xiàn)月經(jīng)病虛寒證患者與正常組相比血清生殖激素(T、E2、FSH、LH)水平降低；CD3+T、CD3+CD86+T、Th2、Th2/Th1、Tc2、TC1、Tc2/Tc1細(xì)胞的含量降低，CD3+CD4+T、CD3+CD4+T/CD3+CD8+T、Th1細(xì)胞含量升高。提示月經(jīng)病虛寒證患者生殖

14、激素水平降低；Ⅰ/Ⅱ型T淋巴細(xì)胞間的極化狀態(tài)發(fā)生改變，呈明顯Ⅰ型T淋巴細(xì)胞優(yōu)勢，并與激素含量有相關(guān)關(guān)系。推測可能由于機(jī)體內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)功能紊亂，卵泡不能正常發(fā)育，導(dǎo)致月經(jīng)過少、月經(jīng)后期、痛經(jīng)等月經(jīng)病虛寒證的發(fā)生。 2.與月經(jīng)病虛熱證比較，虛寒證患者血清中生殖激素水平(E2、LH、T、P、FSH)降低，外周血CD3+CD4+T、CD3+CD4+T/CD3+CD8+T、Th1、Tc1細(xì)胞升高，CD3+CD8+T、Th2、Th2/T