基質(zhì)金屬蛋白酶-8及其抑制劑在成人原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景與目的：
　　腹股溝疝是普外科常見的疾病之一,其發(fā)病因素很多,許多情況下并非單一的因素所致,而是由多種因素共同作用的結(jié)果。引起腹股溝疝(尤其是成人腹股溝疝)發(fā)生的確切機(jī)制目前還不十分清楚。學(xué)術(shù)界廣泛認(rèn)為腹股溝疝的致病因素主要是:①腹壁強(qiáng)度降低(鞘狀突未閉、腹橫筋膜的薄弱);②腹內(nèi)壓增高。其中腹橫筋膜的薄弱在成人原發(fā)性腹股溝疝的形成中起著十分關(guān)鍵的作用。
　　目前,有越來越多的學(xué)者注意到結(jié)締組織代謝異常與腹股溝疝發(fā)生發(fā)展的

2、關(guān)系,相繼有研究結(jié)果報告基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其組織抑制因子(tissue inhibitor of matrix metallo-proteinases,TIMPs)參與了腹股溝疝的發(fā)生發(fā)展過程。MMPs及其抑制因子TIMPs是參與膠原代謝、調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)代謝平衡最重要的酶類。MMPs是一組主要由成纖維細(xì)胞等合成和分泌的Zn2+依賴內(nèi)肽酶,幾乎能降解細(xì)胞外基質(zhì)(extracel

3、lularmatrix,ECM)的所有成分。MMPs目前已發(fā)現(xiàn)有20余種,構(gòu)成MMPs家族,具有高度同源性,一般認(rèn)為,MMP-1、MMP-8、MMP-13參與了Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維的代謝,主要與新合成的膠原纖維的交聯(lián)和成熟有關(guān),且參與疝的發(fā)生。TIMPs是近年來發(fā)現(xiàn)的MMPs天然抑制劑,可通過與MMPs不可逆結(jié)合發(fā)揮抑制作用,防止ECM的降解,在正常ECM重建和各種病理過程中發(fā)揮重要作用。在多數(shù)情況下TIMPs與活化的MMPs按1∶1結(jié)合,

4、從而阻止MMPs與底物的結(jié)合,導(dǎo)致MMPs失活?？梢钥闯?MMPs及其抑制物TIMPs之間的平衡對維持膠原的穩(wěn)定意義重大,在腹股溝疝的發(fā)生中起一定的作用。
　　目前,MMPs和TIMPs在腹股溝疝中的實驗研究非常少,而且其研究結(jié)果有待于進(jìn)一步得到證實。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法,對比分析參與ECM(尤其是膠原成分)代謝平衡的主要酶類MMP-8及TIMP-1在成人腹股溝疝及無疝患者腹橫筋膜組織中的表達(dá)情況,從代謝方面進(jìn)一步探討膠原

5、代謝酶在成人腹股溝疝形成中的作用。該實驗結(jié)果將為進(jìn)一步研究腹股溝疝發(fā)病的分子機(jī)制提供理論基礎(chǔ),并為臨床科學(xué)有效的治療提供理論指導(dǎo)。
　　材料與方法：
　　腹股溝疝發(fā)生組(實驗組)45例來自于2007年7月至2008年7月在鄭大一附院疝和腹壁外科實施原發(fā)性腹股溝疝修補(bǔ)手術(shù)男性患者,取材部位為腹股溝管后壁腹橫筋膜。非疝發(fā)生組(對照組)取自2007年7月至2008年7月,在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院接受下腹部手術(shù)的無腹股溝疝的患者10例

6、,取材部位為下腹壁腹橫筋膜。所有標(biāo)本經(jīng)甲醛固定并作石蠟切片,應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法測定MMP-8及TIMP-1蛋白的表達(dá)情況。依照細(xì)胞著色密度和著色強(qiáng)度半定量評分法對組織免疫組化染色結(jié)果進(jìn)行評分,以≥1分視為陽性。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。分類變量資料采用x2檢驗或Fisher’s精確概率檢驗,相關(guān)性分析采用spearman等級相關(guān)。P≤0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　1.MMP-8和

7、TIMP-1在各組中均有陽性表達(dá),陽性反應(yīng)為棕黃色顆粒,定位成纖維細(xì)胞于胞漿。
　　2.MMP-8和TIMP-1在實驗組中的表達(dá)與對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。MMP-8在實驗組中的表達(dá)率(P=62.2％)高于對照組(P=20.0％),而TIMP-1在實驗組中的表達(dá)率(P=42.2％)低于對照組(P=90.0％)。
　　3.MMP-8在成人原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜組織中的表達(dá)與年齡、疝分型及是否長期吸煙有關(guān)(p<0

8、.05),而與腹股溝疝分類及單或雙側(cè)發(fā)生疝無明顯相關(guān)(p>0.05)。
　　4.TIMP-1在成人原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜組織中的表達(dá)與腹股溝疝患者的年齡、疝分型有關(guān)(p<0.05),而與腹股溝疝分類、單或雙側(cè)發(fā)生疝及是否長期吸煙無明顯相關(guān)(p>0.05)。
　　5.MMP-8和TIMP-1在原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜組織中表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.355,p=0.017)。
　　結(jié)論：
　　1.MMP-8在實驗組中的

9、表達(dá)增高,與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。且發(fā)現(xiàn)MMP-8與年齡和疝分型成正相關(guān),年齡越大,MMP-8表達(dá)越高;提示MMP-8的表達(dá)與組織的老化有關(guān)。MMP-8在Ⅲ型腹股溝疝腹橫筋膜組織中的表達(dá)高于Ⅰ~Ⅱ型,且具有統(tǒng)計學(xué)意義。MMP-8蛋白在抽煙組中呈高表達(dá),與非長期抽煙組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。提示抽煙可能促進(jìn)MMP-8的表達(dá)。
　　2.TIMP-1在實驗組中的表達(dá)降低,與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。且發(fā)現(xiàn)TIMP-1與年齡和疝分型成負(fù)相關(guān)