G蛋白偶聯(lián)受體48參與脂肪分化調節(jié).pdf

1、肥胖實質上是脂肪細胞數(shù)目的增多和脂肪細胞肥大的狀態(tài)，脂肪細胞數(shù)目增多是指由脂肪前體細胞向成熟脂肪細胞分化增加，而脂肪細胞肥大是指脂肪細胞內甘油三酯的積聚。本研究聚焦G蛋白耦聯(lián)受體超家族新成員G蛋白偶聯(lián)受體48(GProtein-CoupledReceptor，Gpr48)在脂肪分化中的作用以及其參與脂肪分化的機制。
　　首先，我們發(fā)現(xiàn)從胚胎發(fā)育后期脂肪開始發(fā)育階段到成年，Gpr48-/-小鼠都存在明顯的脂肪量減少，同時伴隨成熟脂肪

2、細胞分子標記過氧化物酶增殖物激活受體γ2(PPARγ2)、脂肪細胞脂肪酸結合蛋白2(aP2)的表達下調;接著我們在體外實驗中證明，Gpr48SiRNA干擾的前脂肪細胞3T3-L1和Gpr48-/-的小鼠胚胎成纖維細胞(MEFGpr48-/-)不能進行良好的脂肪誘導分化，同時，不僅成熟脂肪細胞分子標記下調，調控脂肪分化的關鍵分子PPARγ2和CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)表達也明顯下調;而在3T3-L1過表達激活型Gpr48則

3、明顯增強該前脂肪細胞的脂肪分化能力，在MEFGpr484-/-過表達激活型Gpr48則恢復了MEFGpr48-/-脂肪分化能力。
　　以上實驗表明Gpr48是參與調控脂肪分化的重要分子。我們還對Gpr48參與調控脂肪分化的機制進行了研究。脂肪分化是受一系列分子級聯(lián)調控的過程，前脂肪細胞先經(jīng)過兩輪克隆增殖后再分化為成熟脂肪細胞，PPARγ2和C/EBPα是調節(jié)脂肪分化的關鍵分子，其受其他分子的調節(jié)，又能直接參與眾多成熟脂肪細胞脂肪代

4、謝酶的表達。
　　Gpr48并未影響MEF體外誘導分化過程中的克隆增殖過程，且Gpr48的表達先于PPARγ2，C/EBPα。進一步研究表明MEFGpr484-/-在體外誘導分化前后都存在明顯的cAMP反應原件結合蛋白(CREB)磷酸化水平下調，而pCREB可以調控PPARγ2，C/EBPα的表達，這種調控是直接結合于PPARγ2，C/EBPα的啟動子區(qū)并促進PPARγ2，C/EBPα的轉錄，而Gpr48敲除則明顯下調了PPARγ

5、2，C/EBPα啟動子區(qū)CREB的磷酸化。Gpr48作為G蛋白耦聯(lián)受體通過cAMP和蛋白激酶A(PKA)信號通路發(fā)揮作用已有文獻證實，我們將cAMP類似物DB-CAMP加入接受脂肪誘導分化的MEFGpr48-/-，結果不僅發(fā)現(xiàn)CREB磷酸化水平得以恢復，且PPARγ2，C/EBPα啟動子區(qū)的pCREB也恢復到對照MEFGpr48+/+水平，該MEFGpr48-/-也恢復了脂肪分化能力。
　　由此，我們認為Gpr48是參與脂肪分化調