L1，β-catenin，E-cadherin在大腸癌中表達(dá)的臨床意義研究.pdf

1、大腸癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)。腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的兩大主要特點(diǎn)，是導(dǎo)致患者術(shù)后死亡的直接原因，因此，闡明影響大腸癌患者預(yù)后及腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的分子生物學(xué)行為，預(yù)測(cè)大腸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移潛能，從而指導(dǎo)臨床治療，采取更積極有效的綜合治療，同時(shí)，為今后大腸癌的基因治療提供理論根據(jù)。 腫瘤浸潤(rùn)是腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用的過程，它包括細(xì)胞黏附、基質(zhì)降解和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)三個(gè)步驟，其中細(xì)胞-細(xì)胞間黏附的破裂

2、是腫瘤轉(zhuǎn)移過程的第一步。 L1型神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(L1)是免疫球蛋白超家族的Ⅰ型跨膜糖蛋白之一，L1通過細(xì)胞間的相互作用的調(diào)節(jié)在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)展中扮演重要的角色，包括神經(jīng)遷徙、神經(jīng)派生和成束、突觸的形成。 L1在多種腫瘤細(xì)胞中被檢測(cè)到，如神經(jīng)、間皮、上皮來源的腫瘤細(xì)胞中，諸如神經(jīng)母細(xì)胞瘤、惡性黑色素瘤、淋巴瘤、小細(xì)胞肺癌、大腸癌和乳腺癌中。L1在惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移事件中扮演重要的角色。 p-環(huán)連素(β-catenin，

3、β-cat)是環(huán)連蛋白家族中的一員，功能多樣，能與20多種蛋白質(zhì)結(jié)合，是一種新的原癌基因的產(chǎn)物。作為具有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞間黏附雙重功能的分子，β-cat是近年來研究異?；钴S的熱點(diǎn)。β-cat參與Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，亦是構(gòu)成黏附連接的E-cad/cat復(fù)合體的胞內(nèi)重要組分，可通過與多種蛋白結(jié)合而參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、增殖分化、侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)過程。 作為細(xì)胞黏附分子之一，表皮-鈣黏附素(E-cadherin，E-cad)是一類鈣依賴性

4、同種上皮細(xì)胞親和性的黏附分子，是維持上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性和極性的跨膜糖蛋白，普遍存在于上皮細(xì)胞、間胚層細(xì)胞和胎盤等處。研究表明，E-cad在多種人類惡性腫瘤中表達(dá)低下，且E-cad的表達(dá)下降與腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)。 本研究采用免疫組化染色方法(EnVision)，檢測(cè)L1、β-cat、E-cad在大腸癌組織中的表達(dá)，評(píng)價(jià)L1、β-cat、E-cad在預(yù)測(cè)大腸癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移潛能及預(yù)后中的臨床意義，從而為大腸癌的綜合治療提供有

5、參考價(jià)值的分子生物學(xué)指標(biāo)。 本研究收集1988-2001年間浙江省人民醫(yī)院肛腸外科行大腸癌手術(shù)病例的組織標(biāo)本142例為實(shí)驗(yàn)組，另選擇來源于正常大腸黏膜標(biāo)本30例和大腸腺瘤標(biāo)本30例為對(duì)照組。大腸癌分期按Dukes法(A期：癌腫局限于腸壁，腸外組織及淋巴結(jié)無累及；B期：癌腫累及腸外組織，但淋巴結(jié)陰性；C期：淋巴已有轉(zhuǎn)移；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移包括于DukesD期內(nèi))。所有標(biāo)本均經(jīng)常規(guī)10％福爾馬林固定，石蠟包埋。每例選擇有代表性的組織蠟塊行連續(xù)

6、切片，分別行HE染色和免疫組織化學(xué)染色(EnVision)，觀察L1、β-cat和E-cad的表達(dá)情況。 本研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用SPSS-14統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料用x2檢驗(yàn)或Fishers確切概率法，單因素生存率計(jì)算用壽命表法，生存率之間的比較用kaplan-meier檢測(cè)；多因素生存率分析用Cox回歸分析；相關(guān)性分析用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。P＜0.05為有顯著性差異。 30例正常大腸黏膜上皮L

7、1染色全部呈陰性；30例大腸腺瘤中L1染色也全部呈陰性；142例大腸癌染色呈陰性者為98例(69.01％)，呈陽性者為44例(30.99％)。提示L1在大腸癌組織中表達(dá)增強(qiáng)。正常黏膜上皮組與大腸癌組比較有明顯差異(P＜0.05)；腺瘤組與大腸癌組比較亦有明顯差異(P＜0.05)。 30例正常大腸黏膜上皮β-cat全部(100％)膜陽性表達(dá)；30例大腸腺瘤中9例(30％)染色呈陰性，21例(70％例呈陽性；而142例大腸癌患者中1

8、01例(71.13％)染色呈陰性，41例(28.87％)呈陽性。提示β-cat在大腸癌組織中膜表達(dá)有所減弱。正常黏膜組、腺瘤組、大腸癌組兩兩比較，均有顯著性差異(p＜0.05)。 30例正常大腸黏膜上皮E-cad染色全部呈陽性；30例大腸腺瘤中9例(30％)染色呈陰性，21例(70％)呈陽性；而142例大腸癌患者中97例(68.30％)染色呈陰性，45例(31.69％)呈陽性。提示E-cad在大腸癌組織中表達(dá)減弱或缺失。正常黏膜

9、組、腺瘤組、大腸癌組兩兩比較，均有顯著性差異(p＜0.05)。 L1、β-cat、E-cad的表達(dá)都與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)深度、靜脈、淋巴管、淋巴結(jié)侵犯與否以及Dukes分期明顯相關(guān)。L1表達(dá)陽性，β-cat、E-cad表達(dá)陰性的患者1、3、5年生存率明顯低于L1表達(dá)陰性，β-cat、E-cad表達(dá)陽性的患者。 多因素分析結(jié)果顯示：Dukes分期、L1表達(dá)強(qiáng)度可顯著預(yù)示術(shù)后生存情況(p＜0.05)。 綜上所述，正常

10、大腸黏膜L1為陰性表達(dá)；β-cat胞膜表達(dá)陽性；E-cad表達(dá)為陽性；L1、β-cat、E-cad染色強(qiáng)度與大腸癌的侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后顯著相關(guān)，L1表達(dá)增強(qiáng)，β-cat、E-cad表達(dá)降低的大腸癌患者病期晚、預(yù)后差；E-cad、β-cat之間呈正相關(guān)，E-cad、β-cat與L1之間呈負(fù)相關(guān)；Dukes分期、L1的表達(dá)強(qiáng)度是大腸癌患者的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)，可顯著預(yù)示生存。 LI、E-cad均為細(xì)胞黏附分子，β-cat是與黏附機(jī)制有關(guān)的環(huán)