Snail、E-CD在大腸癌中表達(dá)臨床意義的研究.pdf

1、大腸癌是我國常見的惡性腫瘤之一, 其發(fā)病率有逐年上升的趨勢.盡管近年來以手術(shù)治療的綜合治療使大腸癌患者的預(yù)后有所改善,但術(shù)后5年生存率仍徘徊在50～60﹪左右.腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的兩大主要特點,也是患者復(fù)發(fā)和死亡的主要原因.因此,闡明影響大腸癌患者預(yù)后及與腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的分子生物學(xué)行為,預(yù)測大腸癌的浸潤和轉(zhuǎn)移潛能,從而指導(dǎo)臨床治療,采取更積極有效的治療,可望減少術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移、提高生存率的目的. 腫瘤浸潤是腫瘤細(xì)

2、胞與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用的過程,它包括細(xì)胞粘附、基質(zhì)降解和細(xì)胞運動三個步驟,其中細(xì)胞一細(xì)胞間粘附的破裂是腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)雜過程的第一步.近年來發(fā)現(xiàn)的粘附分子主要有整合素類(Integrins)、CD44、鈣粘附蛋白類(Cadherins)、免疫球蛋白(Ig)超家族、凝集素類(Selections)等.表皮-鈣粘附素(E-cadherin,E-CD)是一類鈣依賴性同種上皮細(xì)胞親和性的粘附分子,是維持上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性和極性的跨膜糖蛋白,普遍存在于

3、上皮細(xì)胞、間胚層細(xì)胞和胎盤等處.E-CD位于細(xì)胞邊緣,特別是細(xì)胞一細(xì)胞粘附區(qū)域,如果缺乏E-CD的表達(dá),細(xì)胞間就不能相互聚集和粘附.研究表明,E-CD在多種人類惡性腫瘤中表達(dá)低下,且E-CD的表達(dá)下降與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān).Snail是鋅指轉(zhuǎn)錄因子,主要是以其鋅指區(qū)域與E-CD啟動子中Epal元件的E盒結(jié)構(gòu)主鏈上的CANNTG序列結(jié)合而發(fā)揮調(diào)節(jié)E-CD的作用,抑制E-CD的表達(dá),Snail是腫瘤進(jìn)展過程中浸潤的一個重要的調(diào)節(jié)子

4、,與E-CD的表達(dá)成負(fù)相關(guān),是一種促進(jìn)腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的因子,大量的體內(nèi)實驗結(jié)果表明:Snail在多種人類惡性腫瘤中表達(dá)增高,且Snail的高表達(dá)與腫瘤不良的臨床病理特征密切相關(guān).然而,到目前為止,國內(nèi)尚未見有關(guān)E-CD、Snail表達(dá)與大腸癌侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后關(guān)系的研究報道. 本研究采用免疫組化染色方法(EnVision),檢測E-CD、Snail在大腸癌組織中的表達(dá),旨在探討E-CD、Snail與大腸癌浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系.評

5、價E-CD、Snail在預(yù)測大腸癌浸潤、轉(zhuǎn)移潛能及預(yù)后中的臨床意義,從而為大腸癌的綜合治療提供有參考價值的分子生物學(xué)指標(biāo). 本研究收集1988-2001年期間浙江省人民醫(yī)院肛腸外科行大腸癌手術(shù)治療病例的組織標(biāo)本142例為實驗組,另選擇來源于正常大腸粘膜標(biāo)本30例和大腸腺瘤標(biāo)本30例為對照組.全部病例均經(jīng)手術(shù)和病理檢查證實.隨訪時間為4～142個月,中位隨訪時間55.04個月.大腸癌分期按Duke's法分期.所有標(biāo)本均經(jīng)常規(guī)10﹪

6、福爾馬林固定,石蠟包埋.每例選擇有代表性的組織蠟塊行連續(xù)切片,分別行HE染色和免疫組織化學(xué)染色,觀察E-CD、Snail的表達(dá)情況. 本研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理方法采用SPSS-11.5統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,計數(shù)資料用x<'2>檢測或:Fisher's確切概率法,等級分組資料用秩和檢驗;單因素生存率計算用壽命表法,生存率之間的比較用Kaplan-Meier檢測;多因素生存率分析用Cox's回歸分析.p<0.05為有顯著性差異.

7、 研究結(jié)果: 一、E-CD 1.30例正常大腸粘膜上皮E-CD染色,3例(10﹪)中度陽性,27例(90﹪)為強陽性.30例大腸腺瘤中,1例(3.33﹪)染色呈陰性,10例(33.33﹪)呈中度陽性,19例(63.33﹪)呈強陽性.142例大腸癌中,30例(21.13﹪)染色陰性,53例(37.32﹪)呈中度陽性,59例(41.55﹪)呈強陽性.說明E-CD在大腸癌中的表達(dá)低于正常粘膜上皮和大腸腺瘤.正常粘膜上皮組、

8、腺瘤組、大腸癌組兩兩相比,均有明顯差異(p<0.05). 2.E-CD表達(dá)與腫瘤分化程度、浸潤深度、靜脈、淋巴管、淋巴結(jié)侵犯與否、Dukes'分期狀況密切相關(guān)(p<0.05),而與年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤組織學(xué)類型無關(guān)(p>0.05). 3.E-CD陰性表達(dá)組的大腸癌患者術(shù)后1、3、5年的生存率分別為86.67﹪、53.33﹪、33.33﹪,E-CD中度陽性表達(dá)組的大腸癌患者術(shù)后1、3、5年生存率分別為92.45﹪、6

9、0.38﹪、45.28﹪,E-CD強陽性表達(dá)組大腸癌患者術(shù)后1、3、5年生存率分別為100﹪、76.27﹪、49.15﹪,表明E-CD陰性表達(dá)的大腸癌患者預(yù)后明顯較差(p=0.000). 4.在45例Dukes'B期的大腸癌患者中,7例E-CD染色為陰性,其1、3、5年生存率分別為85.71﹪、57.14﹪、0.00﹪,38例E-CD染色為中度陽性或強陽性,其1、3、5年生存率分別為97.37﹪、65.79﹪、39.47﹪.說明

10、在Dukes'B期大腸癌,E-CD陰性表達(dá)患者的預(yù)后明顯較陽性表達(dá)者為差(p=0.0000). 二、Snail 1.正常大腸粘膜上皮Snail染色多呈陰性表達(dá),30例中28例(93.33﹪)染色呈陰性,只有2例(6.67﹪)呈中度陽性,沒有強陽性表達(dá)者.30例大腸腺瘤中22例(73.33﹪)染色呈陰性,8例(26.67﹪)呈中度陽性,也沒有強陽性表達(dá)者.而在142例大腸癌中,呈陰性表達(dá)68例(47.89﹪),60例(42

11、.25﹪)染色呈中度陽性,14例(9.86﹪)呈強陽性.說明Snail在大腸癌中的表達(dá)明顯高于正常粘膜上皮和大腸腺瘤.正常大腸粘膜上皮組、腺瘤組、大腸癌組兩兩相比均有顯著差異(p<0.05). 2.Snail表達(dá)與腫瘤病理組織類型、分化程度、浸潤深度、靜脈、淋巴管、淋巴結(jié)侵犯與否、Dukes'分期明顯相關(guān)(p<0.05),而與年齡、性別、腫瘤大小無相關(guān)性(p>0.05). 3.Snail陰性表達(dá)組大腸癌患者,術(shù)后l、3、

12、5年生存率分別為100﹪、70.59﹪、47.06﹪,Snail中度陽性表達(dá)組大腸癌患者,術(shù)后1、3、5年生存率分別為90﹪、56.67﹪、46.67﹪,Snail強陽性表達(dá)組的大腸癌患者,術(shù)后1、3、5年生存率分別為85.71﹪、50﹪、21.43﹪.表明Snail陽性表達(dá)的大腸癌患者預(yù)后較差.三組之間生存率差異顯著(p=0.000). 4.在45例Dukes'B期的大腸癌患者中,26例Snail染色為陰性,其1、3、5年生存

13、率分別為100﹪、69.23﹪、42.31﹪,19例Snail染色為中度陽性或強陽性,其1、3、5年生存率分別為89.47﹪、57.89﹪、26.32﹪.說明在Dukes'B期大腸癌,Snail陽性表達(dá)者的預(yù)后明顯較陰性表達(dá)者為差(p=0.0002). 三、多因素分析結(jié)果顯示:腫瘤淋巴結(jié)侵犯、Dukes分期、E-CD表達(dá)強度、Snail表達(dá)強度可預(yù)示術(shù)后生存情況(p<0.05). 結(jié)論： 1、正常大腸粘膜E-CD

14、表達(dá)為強陽性或中度陽性,而Snail以陰性為主;大腸癌組織中E-CD表達(dá)強度明顯減弱,而Snail則明顯增強. 2、E-CD和Snail染色強度與大腸癌的侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后明顯相關(guān),E-CD表達(dá)降低和Snail表達(dá)增強的大腸癌患者病期晚、預(yù)后差. 3、Snail表達(dá)與E-CD表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)性. 4、Snail與E-CD的表達(dá)強度均是大腸癌患者的獨立預(yù)后指標(biāo),可預(yù)示生存. 5、在Dukes'B期大腸癌,E-